能源问题与改造酿酒酵母代谢木糖产乙醇的研究.doc

生物工业专题讲座结课论文 题目：能源问题与改造酿酒酵母代谢木糖产乙醇的研究 学号：xx 姓名：xx 能源问题与改造酿酒酵母代谢木糖产乙醇的研究 摘要：随着经济的发展和能源价格的不断上涨以及温室效应的加剧，我们必须要寻找新的代替能源。而且目前化石燃料的储量已经所剩无几了，现在利用木质纤维素生产燃料乙醇已经成为各国的研究热点。木糖是多数木质纤维素水解产物中含量仅次于葡萄糖的一种单糖，传统乙醇生产菌株酿酒酵母不能利用木糖，这为使用以木质纤维素为原料发酵生产乙醇带来了困难。多年以来人们试图通过基因工程和细胞融合等方法对其进行改造使其能够代谢木糖生产乙醇。本文将对乙醇发酵做些论述。 关键词：酿酒酵母，乙醇，基因工程，能源 当今世界，人类社会发展日益加速，无论是在工业，农业，还是第三产业服务业，高新技术产业，都是处于人类历史上空前发展最快的一个阶段。社会的发展对能源（如煤，石油）的需求，从汽车内燃机到家用用电器，无不需要能源去运作。[6,7]，但是却发现这些重组菌株发酵木糖能力较弱。研究显示由于木糖还原酶（xylose reductase, XR）和木糖醇脱氢酶（xylitol dehydrogenase, XDH）的活性分别依赖辅酶NADPH和赖辅酶 NAD+[3-5]，两者的辅助因子不同导致胞内氧化还原失衡，造成木糖醇的累积，从而影响木糖代谢，减少乙醇的产生，这是目前酿酒酵母发酵木糖生产乙醇的一个主要限制因素[6, 8]。有人曾经试图通过改变菌种的遗传背景而使木糖代谢过程中细胞内氧化还原状态维持平衡，如在敲除6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(GDN1)或6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因(ZWF1)的酿酒酵母中同时超表达外源XYL1、XYL2及自身的木酮糖激酶基因(XKS1)，分别构建了重组酿酒酵母 TMB3255 和 TMB3008，其乙醇产率均显著提高。在敲除ZWF1 基因构建的工程菌 TMB3255 中，最高乙醇产量达0.41 g/g，木糖醇产量最低为0.05g/g，但这些突变同时降低了木糖的吸收速率[9]。 在酿酒酵母中引入木糖异构酶基因(XYLA)是使其获得代谢木糖能力的又一途径。经过对表达 XYLA 的酿酒酵母进行进化工程改造，获得了能在木糖上厌氧生长并产乙醇的菌株 RWB-202-AFX[10]。为了进一步提高乙醇产率，除了表达XYLA 基因，Kuyper等[11]又将从木糖转化到糖酵解中间产物所需的全部基因均过量表达，同时将酿酒酵母的醛糖还原酶基因 GRE3 敲除以减少木糖醇产生而得到重组菌 RWB217，其利用木糖产乙醇能力可达 0.43 g/g，乙醇产生速度达到0.46 g/(g·h)。由于通过木糖异构酶将木糖转变为木酮糖仅需要一步反应且不需任何辅酶，所以这一路径的开拓是十分有意义的。 展望 经济的发展必将要求更多的能源供应，而酒精是个很好的选择，因此酒精需求的剧增将刺激酒精生产的技术改进和突破，提高酒精产量。作为地球上最丰富的可再生资源木质纤维素，是生产乙醇的优质材料，关键是开发出能高效发酵木糖生产乙醇的微生物菌种，人们通过对酿酒酵母的改造，已经构建成功可以代谢木糖和葡萄糖产乙醇的菌种，但是还是有些问题需要解决，例如乙醇产量低，副产物多等，现在人们仍在继续研究，以提高产乙醇能力。 随着能源价格的不断上涨以及温室效应的加剧，利用木质纤维素生产燃料乙醇已经成为各国的研究热点，最终必将能够改造成功高发酵乙醇能力的菌种，以满足现在世界的需求。 参考文献： [1]纪占武，郑文范.关于发展生物能源化解能源危机的思考[J].东北大学学报(社会科学 版)，2009，11(6):490一495. [2]SunY，ChengJ.HydrolysisoflingocellulosiematerialsforethanolProduction[J].Biomass Teclmology， 2002，83:3一9. [3]Sun Y, Cheng J. Hydrolysis of lignoeellulosie materials for ethanol production :Areview[J].Bioresource Technology, 2002, 83 (1): 1一11. [4] Anderlund M, Radstrom P，Hahn2Hagerdal B et al .Expression of bifunctional enzymes with xylose reductase and xylitol dehydrogenase activity in Saccharomyces cerevisiae alters product formation during xylose fermentation. Metabo