[医学]光分析法.pptVIP

1.电磁波谱：电磁辐射按波长顺序排列，称~。 2. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 吸收曲线的讨论：----定性,定量分析中选择入射光波长的 重要依据 ?⑴　σ→σ＊跃迁 ? ⑶ π→π＊跃迁 二 常用术语 三、UV-VIS吸收带类型和影响因素 1．R带：由含杂原子的不饱和基团的n →π*跃迁产生 C＝O；C＝N；—N＝N— ε小，λmax250~400nm，εmax100 溶剂极性↑，λmax↓ → 蓝移（短移） 2．K带：由共轭双键的π→ π* 跃迁产生 (—CH＝CH—)n，—CH＝C—CO— λmax 200nm，εmax104 共轭体系增长，λmax↑→红移，εmax↑ 溶剂极性↑，对于—(—CH＝CH—)n— λmax不变 对于—CH＝C—CO— λmax↑→红移 3．B带：由π→ π*跃迁产生 芳香族化合物的主要特征吸收带 λmax =230~270nm，宽带，具有精细结构； εmax 200 极性溶剂中，或苯环连有取代基，其精细结构消失 4．E带：由苯环环形共轭系统的π→ π*跃迁产生 芳香族化合物的特征吸收带 E1 180~184nm εmax104 （常观察不到） E2 200~204nm εmax=7000 强吸收 苯环有发色团取代且与苯环共轭时，E2带与K带合并 一起红移（长移） 图示 影响吸收带位置的因素： 1．溶剂效应： 对λmax影响： next n-π*跃迁：溶剂极性↑，λmax↓蓝移 π-π*跃迁：溶剂极性↑ ，λmax↑红移 对吸收光谱精细结构影响: 溶剂极性↑，苯环精细结构消失 溶剂的选择——极性；纯度高；截止波长 λmax 图示 6.偏离朗伯—比耳定律的原因 非单色光作为入射光引起的偏离原理 五、透光率的测量误差——ΔT 1．光源： 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 3. 样品室 二、分光光度计的类型 3.双波长 第五节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 一、定性分析 （一）定性鉴别 定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数 续前 1．对比吸收光谱的一致性 同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较 2．对比吸收光谱的特征值 3．对比吸光度或吸光系数的比值： 例： （二）纯度检查和杂质限量测定 1．纯度检查（杂质检查） 续前 2．杂质限量的测定： 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCL溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06% 紫外在有机化合物结构辅助解析作用 二、定量分析 （一）单组分的定量方法 1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法 1．吸光系数法（绝对法） 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度（见书P201例1） 解： 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： 例： 解： 2．标准曲线法 芦丁含量测定 3．对照法：外标一点法 例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 2）吸光系数法 （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca