第11章 核酸的结构.pptVIP

第11章、核酸的结构 ;一、核酸的组成 ;二)、 分子组成：核酸的基本结构单位是核苷酸。;嘌呤(purine) ;嘧啶(pyrimidine);戊 糖;1．碱基（base）：又称含氮碱 ;核酸中的嘧啶碱都是嘧啶的衍生物;（2）嘌呤碱（purine, Pu） ;（3）修饰碱基（modified base）： 也称稀有碱基（minor base） ;N,N二甲基鸟嘌呤;2．戊糖（pentose） ;3．磷酸（phosphoric acid） ;二、核苷（nucleoside） ;核苷中戊糖与碱基的连接方式;戊糖与碱基之间的C-N键，称之为N–糖苷键。; 碱基围绕 N-糖苷键的定位有反式和顺式两种。;核苷：AR, GR, UR, CR 脱氧核苷：dAR, dGR, dTR, dCR;3．修饰核苷（modified nucleoside）： 也称稀有核苷（minor nucleoside） ;（1）;（3）; 还有一些核苷，它们的碱基不是嘌呤环，但可把它们看作是鸟苷的衍生物，如Y核苷、Q核苷。 ;按核糖类型分为核（糖核）苷酸和脱氧核（糖核）苷酸两大类。 按磷酸酯化位点分为2’-核苷酸（脱氧核苷酸无此类）、3’-核苷酸和5’-核苷酸。最常见者为5’-核苷酸（5’ 常省略不写）。 ;(2′-AMP);;3’，5’—脱氧核糖核苷酸;; 核苷酸除了链式磷酸酯结构外，还有环式结构，即核苷酸的 5’-磷酸与核糖的 3’-羟基结合成环，如 cAMP，cGMP 。cAMP，cGMP 广泛存 在于动、植物体内，和激素的作用有关。;环式核苷酸结构; ATP类的高能磷酸化合物 ; 核苷多磷酸类 ;含核苷酸的生物活性物质 NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD等都含有 AMP。;是体内合成RNA和DNA的直接原料。 为需能反应提供能量。UTP用于多糖合成，GTP用于蛋白质 合成，ATP用于多种反应 用于信号传递。如cAMP、cGMP是第二信使 参与构成辅酶。如NAD+、FAD+、CoA等都含有AMP成分 参与代谢调控。如鸟苷四磷酸等可抑制核糖体RNA的合成;四、DNA的结构 ;5′端; 无分枝的长链；;5? pApCpTpGpCpT-OH 3? ;碱基顺序为 5’ 3’，不允许颠倒。 A、 C、G、T 代表相应的核苷， P 代表磷酸基，P 在左边，表示核苷 5’-OH 被磷酸化， P 在右边，表示 3’-OH 被磷酸化。;2．DNA分子中核苷酸的排列顺序 ;（二）DNA的二级结构 ;螺距为3.4nm;（2）DNA碱基组成的定量分析 ;2．DNA双螺旋结构模型（double-helical structure） ; DNA的二级结构 ——双螺旋结构;DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;l? 碱基顶部基团裸露在DNA 大沟内?; DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;碱基互补配对 ;稳定DNA双螺旋结构的化学键 ;双螺旋结构模型遗传学意义;3．DNA双螺旋的种类 ;DNA双螺旋结构的多样性;（三）、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装;意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 ;2、原核生物DNA的高级结构;3、DNA在真核生物细胞核内的组装;核小体;(四）、DNA的功能;（一）、RNA的种类、分布、功能;OH;1、信使RNA的结构与功能;* mRNA结构特点;帽子结构; mRNA核内向胞质的转位； mRNA的稳定性维系； 翻译起始的调控。 ;* mRNA的功能 把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。;* tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C ;* tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码环 额外环 TΨC环;;* rRNA的结构;* rRNA的种类（根据沉降系数）; 核蛋白体的组成;六、核 酸 的 理 化 性 质;;1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;(二)、DNA的变性