[基础医学]第5章 酶学.ppt

第五章 酶化学（chemistry of enzyme） 主讲教师：吴海歌 大连大学生物工程学院 本章内容 第一节 酶学通论 第二节 酶促反应动力学 第三节 酶的作用机制和调节 第四节 酶的应用 （pp.319) 要求 酶的化学性质、结构和功能； 酶促反应动力学及酶的应用； 与维生素的密切联系，了解VB族的生理功能； 对调节酶、同工酶、诱导酶、多酶复合体、固定化酶等作较深入了解。 第一节 酶学通论 主要内容： 一、酶促催化反应的特点 二、酶的化学本质及组成 三、酶的命名与分类 四、酶活力的测定和分离纯化 酶学研究简史 公元两千多年前，中国就有酿酒记载。 一百多年前，Pasteur提出发酵是酵母细胞生命活动的结果。 1877年，Kuhne首次提出Enzyme的名词。 1897年，Buchner用酵母提取液（无活细胞），实现了发酵。 1926年，Sumner首次从刀豆中提纯出脲酶结晶。 1982年，Cech首次发现RNA也具有酶的催化活性，提出核酶的概念。 1995年，Jack研究室首先报道了具有DNA连接酶活性的 DNA片段，被称为脱氧核酶(deoxyribozyme)。 一、酶促反应的特征 pp.320 酶的概念 酶——由活细胞产生的，对其特异底物具有高效催化作用的蛋白质(或核酸)。具有可调性和易变性特点。 目前将生物催化剂分为两类 蛋白酶 、核酶（包括：RNA酶、DNA酶） 1. 酶与一般催化剂的共性 在反应前后没有质和量的变化（总的结果是不参与化学反应）； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加快反应速度，不改变平衡点。 2.酶促反应的特点 酶促催化反应具有： pp.321 （1）酶易失活 （2）高效率 （3）专一性 （4）可调性 （1）酶促催化反应的高效率 酶催化的效率： pp.321 通常比非催化反应高108～1020倍， 比一般催化剂高107～1013倍； 条件温和(37℃左右，pH接近中性)； 催化剂加速反应的机理： 改变了反应历程，降低反应活化能。 酶催化比非酶催化更有效地降低反应活化能。 活化能：底物分子从初态转变到活化态(过渡态)所需的能量。(如：A+B→A--B) ●只有生成活化态分子才能发生反应。 （2）酶促反应的专一性 pp.322 ★酶促催化反应具有高度专一性。这是与化学催化剂不同点。 ★酶的专一性(specificity) ——指一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应，并生成一定的产物。 （3）酶促反应的可调节性 pp.322 与化学催化剂不同，酶促反应可受多种因素调节。 调节酶浓度：①诱导或抑制酶合成； ②调节酶降解。 激素调节酶活性：通过细胞膜受体和细胞内受体 反馈抑制调节酶活性 抑制剂和激活剂调节酶活性 其他调节方式： 别构调节、酶原激活、酶的可逆共价修饰等。 除上列调节方式外，还有下列因素可对酶调节酶催化反应速度。主要包括三方面： 条件改变：T、pH、激活剂和抑制剂等变化； [S]改变：对初速度调节； [E]改变：E合成与分解的调节； 二、酶的化学本质及组成 pp.323 1.酶的化学本质： 通常指蛋白质组成的酶类 蛋白质组成依据： ①酸、碱水解产物是氨基酸； ②能被蛋白水解酶催化分解； ③分子量较大，是具有空间结构的生物大分子，凡使蛋白质变性因素，均可使酶变性失活； ④具两性解离和等电点，可电泳分离； ⑤具胶体性质，不能通过半透膜； ⑥具蛋白质所具有的全部呈色反应。 2.酶的分子组成（可分为两类） pp.323 单纯蛋白酶：仅含有酶蛋白质部分。 缀合蛋白酶(也称全酶) 含两部分： **只有在①、②共存时，全酶才具有活性。 酶与辅助因子之间也是专一性结合。 辅助因子分类（按结合紧密程度） pp.324 辅酶 (coenzyme): 与酶蛋白结合疏松，可用透析或超滤等方法除去。 辅基 (prosthetic group): 与酶蛋白结合紧密，不能用透析或超滤等方法除去。 各部分在催化反应中的作用 一种辅助因子可与多种脱辅酶结合，而一种脱辅酶通常仅与一种专一性辅助因子结合。因此： 酶蛋白(脱辅酶)——决定了酶的结构，决定酶促反应专一性； 辅助因子——决定反应的种类与性质 金属酶(metalloenzyme) 金属为酶的活性所必需，与酶蛋白结合紧密，提取过程中不易丢失。 金属激活酶(metal-activated enzyme) 金属为酶的活性所必需，与酶蛋白结合不紧密，提取过程中易丢失。 金属离子的作用 稳定酶