[工程科技]第3章 紫外-可见分光光度法.ppt

（d）非单色光作为入射光引起的偏离（重要）  假设由波长为λ1和λ2的两束单色光组成的入射光通过浓度为c的溶液： 推导可得，当 ?1 ≠ ?2 时，A与 c 不成线性关系 第3章 紫外－可见分光光度法 3.4 分析条件的选择 ultraviolet and visible spectrophotometry, （UV-Vis） （一） 仪器测量条件的选择 1. 适宜的吸光度范围 由朗伯-比尔定律可知： A=lg1/T=εc l 微分后得： dlgT=0.4343dT/T= -εldc 或 0.4343ΔT/T= -εlΔc 设：ΔT =1%， 做Δc/c与透光度T 的曲线 T 在10%～70%之间 Δc/c 小于5%， 对应 的吸光度为： A =1.00～0.15 即最适宜的吸光度A测量范围为0.15~1.00之间。 Δc/c最小时： Tmin＝36.8%, Amin＝0.434 即当A=0.434时，吸光度测量误差最小。 通常根据被测组分的吸收光谱，选择最强吸收带的最大吸收波长为入射波长。当最强吸收峰的峰形比较尖锐时，往往选用吸收稍低，峰形稍平坦的次强峰或肩峰进行测定。 2. 入射光波长的选择 入射光波长的选择原则 保证较高的灵敏度。 曲线较为平坦处，吸光度变化不大，对Beer定律的偏离度比较小。 在保证一定光强的前提下，应使用尽可能窄的谱带宽度。 同时应尽量避免采用尖锐的吸收峰进行定量分析 （二） 反应条件的选择（了解内容，自学） （三） 参比溶液的选择 1、溶剂参比 2、试剂参比（空白溶液做参比） 3、试样参比 当试样中的共存组分有吸收时 4、平行操作溶液参比 用不含被测组分的试样，在相同条件下与被测试样同样进行处理，由此得到平行操作参比溶液。 （四） 干扰及消除方法（了解内容，不作要求） 第3章 紫外－可见分光光度法 3.5 紫外－可见分光光度法的应用 ultraviolet and visible spectrophotometry, （UV-Vis） 紫外-可见分光光度法主要用于物质的定量分析，还可以用于物质的定性分析、结构分析和纯度鉴定。 1.定性分析和结构分析 （了解内容，不作要求） 紫外-可见吸收光谱一般不单独用于化合物的结构分析，通常是配合红外、核磁共振、质谱法做结构鉴定，是一种有用的辅助方法。 它可以提供分子中生色系统和共轭程度的信息，是研究共轭体系和芳环结构的有用工具。 例如，某化合物在近紫外区内无吸收，说明该物质无共轭结构和芳香结构。 2.纯度的鉴定 用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便的。 如生产无水乙醇时通常加入苯进行蒸馏，因此产品中常常含有少量苯。乙醇在近紫外区没有吸收，而苯有（λmax256nm）；利用苯的吸收大小，即可鉴定乙醇的纯度。 3.定量分析 只要求掌握单组分定量的两种方法 （多组分定量、双波长法等 均不作要求） 方法一：校准曲线法 配制一系列不同含量的标准溶液，选用适宜的参比，在相同条件下，测定一系列标准溶液的吸光度，作A-c曲线，即标准曲线。也可用最小二乘法处理，得线性回归方程。 在相同条件下测定未知试样的吸光度，从标准曲线上就可以找到与之对应的未知试样的浓度。 （直接比较法） 即将待测溶液与某一标样溶液，在相同的条件下，测定各自的吸光度，代入朗伯-比尔定律，解方程求出未知样的浓度。 As=Kcs Ax=Kcx 方法二：标准对比法 该方法只有当cs和cx很接近，且在测定浓度范围内完全遵守beer定律时才较为准确。 作业 P50 ： 3.3，3.9，3.10， 3.11题 第三章 紫外-可见分光光度法要点 p23, 有机化合物常见的四种跃迁类型和跃迁时吸收能量的大小顺序； p25-26,常用术语：吸收光谱、吸收峰、最大吸收波长、波谷、肩峰、生色团、助色团、红移、蓝移； p27, 朗伯比耳定律以及相关的定量计算； p33，吸光度测量误差最小的点，适宜测量的透射比范围或吸光度范围 ； p37,四种参比溶液及其判别； p44, 单组分定量方法； 本章课后习题 3.