[医药卫生]组织化学技术2010.pptVIP

* 组织化学技术概述 主讲： 谈 新 提 (人体解剖与组织胚胎学系) 一.组织化学的定义 组织化学（histochemistry）技术是通过化学或物理反应原理显示组织切片或细胞内某种化学成分，进行定位、定量及其与功能相关的研究。 随着科学技术的不断发展，组织化学在近几十年来已经得到了迅速的发展，产生了许多分支，如核酸与蛋白质、蛋白质与氨基酸、脂类与蛋白质、碳水化合物与粘蛋白及粘多糖、无机物组织化学、酶组织化学、电镜组织化学、荧光组织化学、免疫组织化学、同工酶组织化学、定量组织化学、原位杂交组织化学和放射自显影技术等。因此，现代组织化学的概念已经大大的超过了以往的范畴，无论从理论、内容、研究手段、研究范围都比以往更广泛及更深入。 二.组织化学的研究概况 三.组织化学研究的内容 酶类、糖类、脂肪、核酸、蛋白质等 酶（Enzyme） 酶（Enzyme）是具有催化功能的一种特殊蛋白质，人体的各种机能活动都与酶的活性有密切关系，生物体内的一切新陈代谢活动都是在酶的催化作用下进行的。因此，酶在机体内的各种反应和鉴定手段涉及到各种基础学科，如组织、生理、生化和病理等已成为日益为人们所重视的内容之一。 （一）酶的分类 1． 水解酶 2． 氧化还原酶 3． 转化酶 4．连接酶 5． 裂解酶 6． 异构酶 （二）酶的组织化学反应法 1． 偶氮染料法 2． 吲哚酚法 3． 金属---金属盐法 4．氧化-还原反应法 5．色素形成法 酶 类 ? 酸性磷酸酶 Holt与Bitensky改良磷酸铅法 Gomori与McDonedel硫化铅法 碱性磷酸酶 Gomori-Takamatsu法 Gomori改良钙钴法 Gomori萘酚磷酸酯法 琥珀酸脱氢酶 Nachlas硝基蓝四唑法 Pearson二甲亚砜法 过氧化物酶 Graham-Karnovsky法 Vitale辣根过氧化物酶 酸性磷酸酶（Acid Phosphatase , ACP）广泛 分布于机体组织中，它主要位于溶酶体中，也有少量在 内质网中。巨噬细胞、前列腺、空肠上皮纹状缘、肝、 脾、肾及肾上腺等尤为丰富。 Holt与Bitensky改良磷酸铅法 作用原理 试剂配制 染色方法 对照 结果 作用原理 在酸性PH值的情况下，给切片加入甘油磷酸酯（或任何磷酸单酯），如有酸性磷酸酶，则释放磷酸酯，后者与高浓度的Pb2+结合，形成无色的磷酸铅，经硫化胺（或硫化氢）作用，磷酸铅转变为黑色硫化铅： 甘油磷酸酯 磷酸酯+铅 磷酸铅 硫化铅 酸性磷酸酶 试剂配制 ①孵育液 在400ml 0