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四类微生物的分离、培养及鉴定 环境与生物工程学院 环科0701班 摘要：本实验介绍了细菌、放线菌、霉菌、酵母菌常用培养基的配制方法，并阐述了其分离和培养过程。观察和比较分离出来的细菌以及放线菌、酵母菌及霉菌的菌落特征，通过染色法对各类细菌进行鉴定。将从中分离出的几种不同微生物，分别接种于不同培养基上，于35 培养24 h、48 h后，观察记录其生长情况。该研究对混合感染时不同培养基的组合与使用，病原微生物的准确分离与鉴定，以及临床细菌日常检验工作均有一定的指导意义。 Abstract：This experiment is introduced, mould, bacteria, actinomyces commonly preparation methods of medium yeast, and expounds its separation and training process. Observe and compare the isolated bacteria and actinomyces, yeast and mould colony feature, dyeing method for all kinds of bacteria by identification. Isolated from the soil microorganisms, several different respectively in different media, vaccinations in 35 ° c h, 48 h training and observed after its growth record. The study of mixed infection with the combination of different media, pathogenic microorganisms accurate and separating, and clinical bacteria daily inspection work has certain directive significance. Keywords: Microbes, Bacteria, Isolation, Culture, Identification 引言 为了深入了解常用选择性培养基对不同微生物的抑制或筛选能力，为了充分利用各培养基的特殊作用，从而给院内感染监测及临床微生物检验工作者选择利用各培养基及其组合时提供有益参考，我们把从中分离出的几种微生物分别接种于常用培养基上，对比研究了它们的不同生长特点。 革兰氏染色液，载玻片，显微镜、盖玻片、吸水纸，接种针。 大肠杆、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。NaCl的所需量，置于烧杯中，加入所需水量的2／3左右的蒸馏水；用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一小烧杯中，进行称量。然后加入少量蒸馏水于小烧杯中，加热融化，倒入上述烧杯中。 （2）定容：将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。 （3）加琼脂：将所需量的琼脂先放到三角瓶中，再将定容后的培养基倒入三角瓶中。 （4）调pH：待溶液冷至室温时，用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2~7.4。 （5）分装、加塞、包扎。 （6）高压蒸汽灭菌20分钟。 待培养基冷却至60℃左右时，倒入已灭菌的培养皿中，等到培养基完全凝固后，放入冰箱中保存。 2.2高氏一号培养基的配制 （1）称量及溶化：先称量可溶性淀粉，置于一小烧杯中，加入少量冷水，将淀粉调成糊状，加热，使淀粉完全融化。再分别称量KNO3、NaCl、K2HPO4、MgSO4，依次逐一加入水中溶解。 （2）定容：将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。 （3）加琼脂：将所需量的琼脂先放到三角瓶中，再将定容后的培养基倒入三角瓶中。 （4）调pH：待溶液冷至室温时，用1mol/lLNaOH溶液调pH至7.2~7.4。 （5）分装、加塞、包扎。 （6）高压蒸汽灭菌20分钟。 待培养基冷却至60℃左右时，倒入已灭菌的培养皿中，等到培养基完全凝固后，放入冰箱中保存。 2.3马丁氏培养基的配制 （1）称量：称取培养基各成分的所需量。 （2）溶化：在烧杯中加入约2/3所需水量，然后依次逐一加入并溶化培养基各成分。 （3）定容：将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。 （4）加琼脂：将所需量的琼脂先放到三角瓶中，再将定容后的培养基倒入三角瓶中。 （5）加塞、包扎。 （6）高压蒸汽灭菌20分钟。 （7）临用前，加热融化培养基，待冷却至60℃左右，按每1000ml培养基以无菌操作加入3.3ml的链霉素溶液，迅速混匀。 2.4豆芽汁葡萄糖培养基的配制 （1）称取新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100mL水，小火煮沸30min，用纱