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[农林牧渔]第四章食用菌菌种生产
(二)原种、栽培种培养基 二、三级培养基配制的具体方法及步骤 1.称料 先称主料,再称辅料 2.拌料 3.调节pH值 4.分装培养料 5. 清洁(洗或擦)瓶、袋外壁。 6.封口 三、培养基的灭菌 2.孢子分离(有性繁殖) 将试管中的菌种移接至另外的试管培养基上称为转管 。 一级种的扩大培养 步 骤 ①将待接的斜面试管以及一级种接种针等放人已消毒的接种箱内。 一级种的扩大培养 步 骤 ②用75%的酒精溶液棉球擦双手消毒。 ③左手持住空白斜面试管和一级种,右手夹持棉塞,火焰封口。 一级种的扩大培养 步 骤 ④将接种针顶端烧红,并将整支接种棒在火焰上过火。 一级种的扩大培养 步 骤 ⑤挑取黄豆大小的菌丝琼脂块,迅速移接到空白斜面中央,将棉塞塞回试管。 一级种的扩大培养 步 骤 ⑥将已接种好的试管放人恒温培养箱,在24—28℃下培养,长满试管即可使用。 转管 返回本节 三、原种、栽培种的接种 接原种 用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上 返回本节 返回本节 接栽 培种 用接种匙(镊、铲)取枣大原种 放于袋的两端或瓶中料面上 表面老菌丝及老种块勿接入 返回本节 栽培种接种 返回本节 第五节 菌种培养与质量鉴定 一、菌种培养 (一)培养条件(二)技术环节 二、菌种质量鉴定 (一)母种质量鉴定(二)原种和栽培种质量鉴定 返回本章 (一)培养条件 场所清洁 空气清新 光线暗 空气湿度60%~70% 温度约25℃ 一、菌种培养 返回本节 (二)技术环节 1.母种培养 及时挑拣污染管 分离的母种要纯化→出菇试验 →使用 控制菌龄(即将长满斜面) 培养时间5~10天 返回本节 母种培养 返回本节 2.原种栽培种的培养 培养时间:约30天 勿堆放过挤 及时挑拣污染瓶(袋) 栽培种的菌袋缺氧时可刺孔增氧 控制菌龄(菌丝长满后7~10天使用) 返回本节 返回本节 刺孔点 返回本节 返回本节 二、菌种质量的鉴定 形态特征、生理特性、栽培性状、经济效益等 鉴定项目 (一)母种质量的鉴定 、 菌丝白、整齐、粗壮、有弹性、萌发快等 1.外观 好 差 丝干燥、收缩、自溶产生红褐色液体等 返回本节 退化母种 好母种 返回本节 2.鉴定 耐干湿性试验 接入母种→正常生长 原种培养基含水量 <50% >70% 耐高温性试验 仍正常生长 适温培养7天 30~35 ℃锻炼24h 再适温培养 返回本节 出菇试验 栽培 出菇快产量高品质好抗逆性强 返回本节 (二)原种、栽培种质量的鉴定 具有 菌丝白均匀、粗壮、有菇香味接种后萌发快 菌种种类 品种名称 菌种级别 代 时 生产厂家 接种日期 用于生产 没有 无杂色、无黄水、无结皮、等现象 返回本节 产生原基 返回本节 类型 天然:天然有机物合成:已知成分的化学药品半合成:二者结合 原料来源 状态 液体:营养液 固体 固体:天然固体原料固化:加1.5%~2%琼脂 表面形状 斜面培养基 平板培养基 (二)培养基的类型 返回本节 粉状 条状 属天然植物多糖?融点96℃以上凝点40 ℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用 特性 返回本节 返回本节 二、各级菌种的培养基 (一)母种培养基 1.通用配方 2.配制过程 PDA 马铃薯200g、葡萄糖20g琼脂15~20g、水1000m1 返回本节 煮沸20min,取定量滤液 制马铃薯滤液 滤液沸时加入,融后加余料 融化琼脂 勿污管口,控制装量 分装试管 准备灭菌 扎捆 调解pH 10%NaOH或HCL 返回本节 棉塞制作过程 返回本节 白糖1,石灰1,过磷酸钙1 辅料 棉籽壳87,麦麸10 主料 配方(%) 棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量 配制 1.种类(1)棉籽壳培养基 返回本节 石膏粉1%,碳酸钙0.5% 辅料 麦粒、玉米粒等98.5% 主料 调pH与分装 pH:一般为8.0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋 配方(%) 颗粒洗净,1%石灰水泡胀文火煮沸15~20min晾至无明水后拌入余料 配制 (2)颗粒培养基 返回本节 返回本节 栽培种的装袋 返回本节 (一)母种培养基的灭菌 无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天 灭菌与摆斜面 摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃) 20~30min 返回本节 (二)原种、栽培种培养基的灭菌 高压灭菌 1.5kg/cm2(152kpa、128.1℃)灭菌1~2h 返回本节 常压灭菌 100℃灭菌10h左右→再闷12h 要求 攻头、控中、保尾 返回本节 第四节 菌种的接种 一、无菌
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