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- 2018-02-17 发布于浙江
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[医药卫生]天然产物研究新技术
高效液相色谱法 天然产物在线鉴定技术 高通量筛选技术 其他:逆流色谱、膜分离 高效液相色谱法 吸附原理:相似相吸 影响吸附过程的三要素: 吸附剂(固定相), 溶质(被分离物质), 溶剂(洗脱剂,展开剂,流动相) 正相色谱: 固定相极性大,如水、缓冲液等; 流动相极性小,如氯仿、乙酸乙酯等。 载体:硅胶(含水可达17%),硅藻土,纤维素等。 用途:分离极性大或水溶性成分,如苷类、糖、生 物碱等。 洗脱顺序:极性小的物质先被洗脱出来。 1. 结构流程 梯度淋洗方式 主要部件 (2) 进样装置 (3) 高效分离柱 HPLC 色谱柱结构 (4) 检测器 工作原理: 基于Lambert-Beer定律,即被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比 A=lg Io/I=εbc ????其中A为吸光度(消光值),Io为入射光强,I为透射光强,ε为样品的吸光度(消光系数)b为光程长,c为样品浓度。也有人将其归为通用型检测器: 原因:约有80%的分析样品具有紫外吸收,可以使用这种检测器检测。 优点: a: 灵敏度高,检测下限约为 10-6 g/ml b: 线性范围广 C: 对温度和流速不敏感,适于进行
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