[生物学]离体快繁与脱毒.ppt

第五章植物离体快繁和无病毒植株培养 董 雯 生物技术教研室 器官和组织培养是植物细胞工程重 要的组成内容。 器官培养：是指植物某一器官的全部或部分或器官的原基的培养，包括茎段、茎尖、块茎、球茎、叶片、子叶、花序、花瓣、子房、花药、花托、果实、种子等。 器官外植体是植物的一部分，器官培养包括： 营养器官（根、茎尖、节间、叶、地下茎、鳞茎片）如茎尖培养、茎段培养、叶片培养； 生殖器官（花药、胚珠）如花药培养、胚培养等。 解决问题： 1、快繁 2、脱病毒 3、单倍体育种 4、研究器官分化和形态建成 植物组织培养： 广义：包括各种类型外植体的培养，亦即离体培养。 狭义：包括形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官组织，以及其培养产生的愈伤组织。 5.1 植物的离体快速无性繁殖 5.1.1 离体无性繁殖的概念和优越性 一、 快速无性繁殖的概念 利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法（技术）称离体无性繁殖，由于这种繁殖方式繁殖数量大、速度快，因此也称离体快速无性繁殖。 植物离体繁殖又称植物快繁或微繁，是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。 用这种方法得到的植株群体来自一个单株（或一个单芽），它们的遗传组成相同，这些株群可称单株无性系或单芽无性系。 二、 离体快速无性繁殖的优越性 首先体现在一个“快”字上。它与传统无性繁殖的区别就在于繁殖速度快，每年以数万倍，数十万倍乃至数百万倍的速度进行繁殖。 另一优越性是将植物的无性繁殖从田间移至室内，使生产不受大自然的干扰，使育苗工厂化。 离体无性繁殖技术是目前植物细胞工程技术应用的主流之一。据国内外报道，该项技术广泛应用于花卉、蔬菜、果树、药材和林木的生产，目的有如下几个方面： (1) 扩大繁殖珍稀植物资源和育种原始材料 (2) 扩繁经济效益高，但难于繁殖的植物。 (3) 繁殖和保存经过病毒鉴定的无毒原种。 (4) 繁殖销售量大，但一时用常规（分株、扦插、播种）方法，难以满足数量上需要的植物 （1）扩大繁殖珍稀植物资源和育种原始材料 野生抗性资源，诸如抗病、虫、抗旱、抗盐等野生资源； 自然突变资源（果树上的芽变）； 农作物、蔬菜、花卉上的雄性不育材料。珍稀资源如维生素含量极高的猕猴桃、黑穗醋栗维生素C的含量是柑橘的4倍，苹果的40倍。 木质坚硬，纹理美观并具有特殊光泽的林木黄波罗、沉水木以及药材、花卉、金花茶等。 （2）扩繁经济效益高，但难于繁殖的植物。 如宿根花卉兰花；球根花卉郁金香、百合、唐首蒲、观叶植物等。 （3）繁殖和保存经过病毒鉴定的无毒原种。 如花卉方面的香石竹、大丽花、唐茁蒲；果 树方面的树荡、草薄、苹果（茎陷病毒）；蔬 菜方面的大蒜、马铃薯等。 （4）繁殖销售量大，但一时用常规（分株、扦插、播种）方法，难以满足数量上需要的植物。 如草皮、观叶植物、一二年生花卉（霞草）。 据罗士韦（1982）报道，离体快速无性繁殖涉及的植物种，已远远超过255个种。据统计涉及116科，408种。 其中：兰花66属；蕨类9科，17种；观赏花木51科，208种；森林28科，99种；果树28属；蔬莱39种；农作物46种。 5.1.2 离体无性繁殖中的器官发生方式 植物离体快速无性繁殖时，由于植物种类的不同，所采用的外植体类型不同及培养基的化学组成不同，因而器官再生途径有很大的差异。 植物快繁的器官形成方式 1 不定芽型 2 器官型 3 器官发生型 4 类胚体发生型 5 原球茎发生型 一、 不定芽型 诱导顶端分生组织产生不定芽，再生成植株的方式。即选取已经发育成熟的顶芽和腋芽，连同它们的短枝经表面灭菌后，在无菌条件下培养，诱导不定芽并使其生根形成植株的方式。只要有明显的顶端分生组织和次生组织的植物均适用。 不少植物具有大量的腋芽分生组织，但在整体植物上由于顶端优势效应，多数腋芽受到内源激素的制约而抑制生长。 若将腋芽从整体植物上分离下来，给以相应的培养条件，即可形成大量不定芽。 不定芽发生型的特点： 不仅繁殖率高，利用外植体原有的芽，包括隐芽在内繁殖数量大，同时能保持该植物种的遗传稳定性。 二、 器官型 从器官外植体诱导不定芽，再生成植株的方式。即选取充分发育的器官诸如茎、叶、花器、鳞片等。经离体培养而产生植株的方式。 器官型特点： 遗传性也比较稳定，但繁殖速度