基因工程第1章绪论.pptVIP

基因工程与“上帝” 基因工程——未来的“上帝”？ 基因——“上帝”编写的程序？ 以基因工程复制“耶稣”的可能性？ 现在人类也可以创造人类了，那么“上帝”是谁呢？ 克隆人——从基因水平上打造新人类！ 第一章 绪论 基因工程的含义 基因工程的理论依据和技术基础 基因工程的诞生 基因工程的基本操作步骤 基因工程的支撑技术 基因工程的研究内容 1 基因工程的含义 基本含义 按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对一种生物（供体）的遗传物质（DNA ）直接进行体外重组操作与改造，并转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。 获得一种生物（供体）的遗传物质（DNA ） 与载体相连（体外重组） 转移到另外一种生物（受体）中 筛选目的宿主细胞、检测基因的表达 DNA的体外重组=DNA重组技术 指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术 供体、受体、载体是DNA重组技术的三大基本元件。 克隆（Clone） 当作名词使用时，是指从一个共同祖先无性繁殖下来的一群遗传上相同的 DNA 分子、细胞或个体所组成的特殊的生命群体。 当作动词使用时，则是指从同一祖先产生这类同一的DNA 分子群体、细胞群体或个体群体的过程。 DNA重组技术 是基因工程的核心内容 严格地说，基因工程除上述定义所阐明的内容外，还包括体外 DNA 突变、基因的化学合成等。 DNA重组技术不等于基因工程 基因工程：也可指DNA重组技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术。 上游技术：外源基因重组、克隆和表达的设计与构建（ DNA重组技术） 下游技术：含有外源基因的生物细胞（基因工程菌或细胞）的大规模培养以及外源基因的表达、分离、纯化过程。 遗传工程 内容比基因工程有更广泛，各种人工改造生物遗传性的技术如物理化学诱变、细胞融合、花粉培育、常规育种、有性杂交等 遗传工程包括基因工程，但不等于基因工程。 2 基因工程的理论依据 （1）不同基因具有相同的物质基础 （2）基因是可以切割的 （3）基因是可以转移的 （4）多肽与基因之间存在对应关系 （5）遗传密码是通用的 （6）基因通过复制可以把遗传信息传递给下一代 2.1 基因工程诞生的理论基础 （1） DNA是生物体主要的遗传物质（1944、1952） 1）肺炎双球菌转化实验（1944） Avery等：确定了基因的 化学本质是DNA而不是蛋白质 2）噬菌体转染实验（1952） Alfred Hershy和Marsha Chase进一步证明遗传物质是DNA。 （2）DNA的双螺旋结构和半保留复制机理（1953～1958） （3）中心法则（1958～1971）与遗传密码（1960’） 1957年 Crick提出，1971年又作了部分修改 2.2 基因工程诞生的技术基础 （1）限制性内切酶和DNA连接酶 1970年史密斯博士等第一次分离出这种酶 DNA连接酶（1967） 1967年5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。1970年，美国Khorana实验室，发现T4 DNA连接酶，具有更高的连接活性。 （2）载体的使用和感受态体系的建立 1972年前后使用小分子量的细菌质粒和?噬菌体作载体。在细菌细胞里的大量扩增。 1970年M.Mandel和A.Higa发现经过氯化钙处理的大肠杆菌容易吸收噬菌体DNA。1972年S.Cohen发现这种处理过的细菌同样能吸收质粒DNA。 （3）逆转录酶的发现（1970） 3 基因工程的诞生 1. Berg的开创性实验 1972年斯坦福大学的Paul Berg小组完成了首次体外重组实验：将SV40的DNA片断与?噬菌体的DNA片断连接起来。 2. Boyer-Cohen实验 1973年斯坦福大学的S. Cohen小组将含有卡那霉素抗性基因的大肠杆菌R6-5质粒与含有四环素抗性基因的另一种大肠杆菌质粒pSC101连接成重组质粒，具有双重抗药性。 后来又把非洲爪蟾核糖体基因片断同pSC101质粒重组，转化大肠杆菌，并在菌体内成功转录出相应的mRNA。这是第一次成功的基因克隆实验。 Herb Boyer后来还参与组建世界上第一家基因工程公司Genetech。 基因工程简史 （1）基因工程的准备阶段——理论和技术的成熟 （2）基因工程的问世——1973年，Cohen等获得了具有新的抗性标记的重组菌落，标志着基因工程的诞生。 （3）迅速发展阶段——转基因小鼠（1980）、转基因烟草（1983）、基因工程药物、基因治疗（1990）、人类基因组计划（1990） 基因工程的特征 1. 跨物种性