皂甙分析.pptVIP

第十章 皂甙分析 一、结构与分析 结构与分类 ·皂苷的含义及分布★ ·皂苷的分类★★★　　　　　　　　　　　　　　　　　 ┌ 甾体皂苷 皂苷根据水解后苷元的结构类型分为两大类 ┤　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　 　└ 三萜皂苷 皂甙元、糖、糖醛酸或有机酸 二、分布 甾体皂苷 菝契，穿山龙，土茯苓，麦冬 三萜皂苷 人参，三七，甘草，柴胡，黄芪，桔梗，地榆 三、性质 性状 溶解度 溶于水、醇，不溶于非极性有机溶剂 水解性 较其他苷难，可酸水解或酶水解 酸碱性 甾体皂甙呈中性 三萜皂甙显弱酸性 鉴别方法 泡沫反应 中性皂甙碱性条件下的泡沫较酸性条件稳定 酸性皂甙在酸碱性条件下无差异 溶血反应 沉淀反应 重金属 中性盐：硫酸铵、醋酸铅-----酸性皂甙 碱性盐：氢氧化钡、碱式醋酸铅-----中性皂甙 显色反应 硫酸、硝酸、醋酐-硫酸、醋酸-乙酰氯 色谱法 TLC 极性基团越多，展开剂极性越强 含量测定 比色法 紫外分光光度法 薄层色谱扫描法 高效液相色谱法 HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量 1.药材来源：本品为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao或膜荚黄芪A. membranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根。 2. 主要化学成分：含皂苷、黄酮及多糖成分等。皂苷类成分包括黄芪皂苷I~VIII及大豆皂苷I; 黄酮类成分有芒柄花素、毛蕊异黄酮及其苷类等。 ①色谱条件： 岛津LC-10A高效液相色谱仪 Alltech ELSD 500蒸发激光散射检测器 色谱柱为大连依利特ODS柱(4.6mm×250mm)； 流动相: 乙腈－水(36: 64)，流速为0.8ml/min, 漂移管温度：100℃，氮气流速：2.74ml/min； 进样量20μl。 ②供试样品的制备：药材粉碎，过40目筛，干燥至恒重，称取约1.5g，精密称定，置索氏提取器中加甲醇80ml，回流提取5h，回收甲醇，残渣加水10ml超声溶解后，转移至分液漏斗中，以水饱和的正丁醇萃取4次，每次20ml，合并正丁醇萃取液，用氨试液（40ml浓氨水加水配成100ml）洗涤2次，每次20ml，弃去碱水层，将正丁醇层减压回收至干，用甲醇溶解并定容至5.0ml，摇匀备用。 ③标准曲线的制备：精密称取黄芪甲苷对照品加甲醇制成1.008mg/ml的黄芪甲苷对照品溶液，精密吸取上述对照品溶液100, 200, 300, 400, 500, 600μl，置于1ml的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。进样20μl，以进样量为横坐标，峰面积的常用对数值为纵坐标绘制标准曲线。回归方程为：Y=1.6236X+9.9065，r=0.9997( 2.016～12.096μg)。 样品测定：取不同来源的3批黄芪药材各约1.5g，精密称定，按“供试样品的制备”项下处理并测定，结果分别为0.1689%, 0.1090%,0.1206%。 复习思考题 用比色法测定中药中总皂苷的含量实验时，如何提高测定结果的准确性？ 示例茅莓的化学成分、有效部位提取工艺 2 制备型RP-HPLC法同时分离2个茅莓 皂苷单体成分（化合物1和化合物2） 1 茅莓化学成分的分离鉴定 茅 莓 #蔷薇科悬钩子属植物 #分布于华东和中南各省 #祖国医学文献记载，具有清热凉血，活血止血等多 种功能；安徽省民间用于妇科止血，疗效显著 #药理实验表明，茅莓的水提取物具有止血和活血 化瘀作用 #化学成分报道较少，本文对茅莓的化学成分进行 了系统研究，从茅莓根中分离得到6个化合物， 其中化合物3、4、5和6为首次从该植物中分 离得到 。 化合物4和5的理化性质 化合物4 ： C30H50O4 白色颗粒状结晶（MeOH） mp290～292℃ 易溶于氯仿、醋酸乙酯、 甲醇、乙醇等 Liebermann-Burchard试验呈(+)和Molish试验呈(-) 初步判断为三萜类化合物 化合物5： C30H50O5 白色颗粒状结晶（MeOH） mp280～282℃ 易溶于氯仿、醋酸乙酯、甲醇、乙醇等 Liebermann-Burchard试验呈(+)和Molish试验呈(-) 初步判断为三萜类化合物。 化合物4和5的光谱特征数据