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《蛋白质与酶工程》教学大纲
课程名称:蛋白质与酶工程
学分:2
学时:32
先修课程:生物化学
适用专业:生物工程
开课系部:生命科学学院
一、课程性质、目的和培养目标
课程性质:专业选修课
课程目的:本课程是生物工程本科专业选修课,目的是让学生在学习了普通生化的基础上,进一步对蛋白质和酶工程进行深入系统的学习。并对于酶在生产实践中的应用,也能有一些感性和理性的认识。
课程培养目标:采用多媒体课件和国内外最新的教学参考书、教案,灵活运用多种教学方法,因材施教,使学生在牢固掌握基础知识和基本概念的同时,得到科学研究、科学思维和科学方法的良好训练,为其他专业基础课和专业课的学习及日后的研究工作打下基础。
二、课程内容和建议学时分配
第一章 绪论????????????????????????????????????????? ???2课时
(一)教学基本要求
掌握蛋白质工程和酶工程的定义,了解其发展史,以及应用前景。
(二)教学内容
第一节 蛋白质工程概论
第二节 蛋白质工程的应用
第三节 蛋白质工程展望
第四节 酶工程简介
一 酶工程
二 组成:酶的产生;酶的分离纯化;酶的固定化;生物反应器。
三 分类:化学酶工程;生物酶工程。
第五节 酶与酶工程的发展简史
一 酶学研究简史
二 酶工程研究简史
(三)教学重点和难点
重点:蛋白质与酶工程定义; 难点:酶工程的组成分类
第二章 蛋白质的结构与功能 2课时
(一)教学基本要求
掌握蛋白质的基本结构组成及功能
(二)教学内容
第一节 蛋白质的基本结构与功能
一 蛋白质的组成
二 蛋白质的一级结构
三 蛋白质一级结构与功能的关系
第二节 蛋白质的空间结构与功能
一 蛋白质的二级结构
二 超二级结构和结构域
三 蛋白质的三级结构
四 蛋白质空间结构与功能的关系
五 蛋白质-蛋白质相互作用
(三)教学重点和难点
重点:蛋白质的空间结构;难点:蛋白质间的相互作用;
第三章 蛋白质的修饰和表达 4课时
(一)教学基本要求
掌握蛋白质的化学修饰途经,了解蛋白质改造的一些途经等。
(二)教学内容
第一节 蛋白质修饰的化学途径一 功能基团的特异性修饰 1多位点取代 2单一的或限制性取代 3次级取代二 基于蛋白质片段的嵌合修饰
第二节 蛋白质改造的分子生物学途径一 编码基因的专一性位点和区域性定向突变 1编码基因的专一性位点突变 2区域性定向突变二 基因融合和基因剪接
三 tRNA介导定点搀入非天然氨基酸第三节 重组蛋白质的表达一 目标蛋白质在大肠杆菌中的表达 1表达载体的一般特点 2与外源基因有效表达的相关因素 3改善表达水平及溶解性的方法二 目标蛋白质在酵母细胞中的表达三 重组蛋白质在哺乳动物细胞中的表达116 1选择哺乳动物细胞表达体系的优点 2两个主要的哺乳动物细胞表达系统四 噬菌体显示
(三)教学重点和难点
重点:蛋白质的修饰和表达;难点:蛋白质间的修饰;
第四章 蛋白质的分离纯化及酶的分离工程 8课时
(一)教学基本要求
了解蛋白质和酶分离的一般过程、生物材料的处理方法,掌握酶的分析方法和分离纯化的方法、技术。
(二)教学内容
第一节 蛋白质分析分离中的电泳技术
第二节 色谱技术及高效液相色谱
第三节 酶的分析法:酶活力测定、活力测定方法、酶法分析以及酶分离纯化的一般原则
第四节 细胞的破碎及酶的提取
一 生物材料的破碎:机械破碎法、物理破碎法、温度差破碎法、压力差破碎法、超声波法、化学破碎法、酶促破碎法
二 酶液的提取:盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取、有机溶剂提取
第五节 酶的纯化
一 调节溶解度的方法
二 根据酶分子大小、形状不同的分离方法
三 根据酶分子电荷性质的方法
四 根据专一性结合的方法
五 酶的结晶
第六节 酶纯度的检验
第七节 浓缩与干燥
第八节 酶的生产:生产方法、生产工艺、实例
(三)教学重点和难点
重点:蛋白质的分离及酶的分离;难点:酶的纯化与蛋白质的纯化;
第五章 酶与细胞固定化 4课时
(一)教学基本要求
了解细胞及原生质体的固定化、固定化酶的制备原则;掌握酶的固定化方法及常见酶的固定技术。
(二)教学内容
第一节 固定化酶(immobilized enzyme)的定
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