计算机模拟实验(二).docVIP

计算机模拟实验（二） Hodgkin电压钳模拟实验 Experiment of Hodgkin voltage clamp 【教学对象与学时】 一、教学对象：五年制本科 二、学时：2学时 【预习要求】 预习细胞膜电导 【目的要求】 了解细胞膜电导的概念； 观察细胞膜不同跨膜电位水平时，Na+ 、K+电导的变化； 分析钠通道与钾通道的特殊性质，更好地理解动作电位产生的机制。 【重点和难点】 重点 掌握膜电导（膜通透性）的概念； 了解细胞膜不同跨膜电位水平时，Na+ 、K+电导的变化 难点 电压钳的工作机制； 理解细胞膜在不同跨膜电位水平时的钠、钾通道的不同状态 【教学过程设计】（该部分内容反映教师将如何组织教学，对于设计性实验尤为重要） 课前提问和预习检查； 讲解电压钳的工作原理； 介绍实验操作步骤； 学生分组进行计算机操作； 5. 实验结束前汇总全班实验结果，分析讨论细胞膜处于不同跨膜电位水平时，Na+ 、K+电导的变化情况，以进一步理解动作电位形成的机制。 【课前预习检查或提问】 什么是膜电导（膜通透性）？ 钠通道、钾通道分别有何特性？ 【课前讲解】 实验设计原理 1. 电压钳制原理 根据欧姆定律gm=Im / Um，将膜电位固定起来，那么测量一个变量（Um），就可计算出任何瞬间的膜电导（gm）。电压钳技术就是按照这个目的设计的。实验布置如下图，其中应用了两个微电极，一个是测量 膜电位用的，另一个是通电留用的。 设定一个“指令电压“，要求膜电位 钳制在某一电压值上。另外有一个反 馈放大器，它将指令电压与测量到的 膜电位进行比较，并根据两者差决定 通向细胞内的电流量与电流方向，纠 正膜电位，是膜电位与指令电位保持 一致。这样，实际的膜电位就可以被 钳制在实验者所需求的指令电压值上， 保持恒定不变。在这种情况下，如果 发生离子流动，那么，在通电电极上 将会发出与离子流产生的电流大小相 等，方向相反的电流，来抵偿膜电位的变化，是膜电位保持恒定，而通电电流的大小与时间过程也就标志了离子电流的大小与实践过程，不过方向相反而已。例如，将电压从静息电位调到超过阈值的去极化电位，则Na+流入，于是控制器随即从电极流出的电流量恰等于Na+流入细胞内的量，因为两个电流相符抵消，所以膜电位恒定不变。 2. 膜电导的概念 离子做跨膜移动式形成了跨膜离子流，而通透性亦即离子通过膜的难易程度可用膜的电阻或其倒数电导表示。因此所谓膜对某种离子的通透性增大时，实际是膜对该离子电导加大；对于带电离子来说，膜电导就是膜通透性的同义语。 3. 钠通道的特性 Na+通道具有三种不同的 状态：备用、激活、失活 状态。当膜电位处于静息 水平时，Na+通道为备用状 态，可被激活，在膜电位 超过阈值去极化后，Na+通 道仅在几毫秒之内是激活 状态，当膜电位正于-50mv 经数秒后，Na+通道即处于 失活状态，当膜电位复极 化到-60mv时，Na+通道开 激活状态Voltage clamp In the space clamp procedure, the membrane current includes the capacitive component as a confounding source. The capacitive component can be eliminated by keeping the membrane voltage constant during the measurement. Such a procedure is called voltage clamp. Because the capacitive current, the first term on the right side of Equation 4.2, is proportional to the time derivative of the voltage, the capacitive current is zero if the derivative of the voltage is zero. In this case the equation representing the membrane current reduces to: im = imI (4.3) and the membrane current is composed solely of ionic currents. (In the moment following the onset of the volt