生物制药 第五章 植物细胞工程制药.ppt

植物次级代谢产物– 药用、食品、化工和农业化学的重要原料 利用植物细胞工程技术生产含量低、天然资源匮乏、结构复杂、化学合成困难的天然药物等有用物质。 一、基本概念 1．植物组织和器官培养 在无菌和人工控制的营养（培养基）及环境条件（光照、温度等），研究植物的细胞、组织和器官以及控制其生长发育的技术。 2．悬浮培养：在液体培养基中，能够保持良好分散性的细胞和小的细胞聚集体的培养。组织化水平较低。 3．细胞培养：利用单个细胞进行液体或固体培养，诱导其增殖及分化。目的是为了得到单细胞无性繁殖系。 4．分生组织培养： 又称生长锥培养，是指在人工培养基上培养茎端分生组织细胞。 分生组织 – 茎尖分生组织的部位仅限于顶端圆锥区 5．外植体：是指用于植物组织（细胞）培养的器官或组织的切段，植物的各部位均可作为外植体进行组织培养。 6．器官形成：是指在组织培养或悬浮培养物中芽、根或花等器官的分化与形成。或者在先形成的小根基部迅速形成愈伤组织，然后再形成芽；或者在不同部位分别形成芽和根之后，再形成维管组织而将二者连成一个轴，最后形成小植株。 7．无性繁殖系（克隆）：是指使用母体培养物反复进行续代培养时，通过同种外植体而获得越来越多的无性繁殖后代而言，如根无性系、组织无性系、悬浮培养物无性系等。 8．突变体：细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的新细胞，即为突变体。 9．继代培养：由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一代称为“第一代培养”。 连续多代培养即为“继代培养”，又称“连续培养” 10.次级代谢和次级代谢产物 1）有明显的分类学区域界限； 2）其合成需在一定的条件下才能合成； 3）缺乏明确的生理功能； 4）是生命的多余成分。 生物碱、黄酮体、萜类、有机酸、木质素等 40年代末到50年代，Skoog和我国学者崔澄，发现腺嘌呤或腺苷能够解除培养基中生长素（IAA）对芽形成的抑制作用，并诱导芽的形成。 腺嘌呤/生长素比例高时，产生芽，比例低时，则形成根。 1956年 Miller等，发现激动素（kinetin,KT）,后来又发现激动素亦可促进芽的形成，其效力为腺嘌呤的30,000倍。 来自于植物体和细胞培养的紫草宁含量比较 第三节 植物细胞的形态和生理特性 单细胞植物，由单细胞构成。 游离的或排列疏松的薄壁细胞多呈球形、类圆形、椭圆形； 排列紧密地细胞多呈角形； 具有支持作用的细胞，细胞壁常增厚，呈类圆形、纺锤性等； 具有输导作用的细胞则呈管状。 植物细胞大小不一。几十μm ~ 数十米 植物细胞的3个特点：细胞壁、液泡、质体（如叶绿体） 1. 细胞壁:植物细胞最显著的特征之一是具有一定硬度和弹性的细胞壁。 组成：纤维素、半纤维素、果胶、结构蛋白质,对很多生物活性成分具有通透性。 2. 原生质体 ：是细胞内有生命的物质，是细胞的主要成分，细胞的一切代谢活动的场所，包括细胞质、细胞核、液泡 1) 细胞质 细胞壁和细胞核之间，为半透明的基质 ①质膜（plasmic membrane） ? 紧贴其外的是细胞膜，半透明，对各种离子和分子的透性是有选择性的，但对水分子能自由通过，调节着细胞与其周围环境间的物质交换。 ? 被着液泡的膜 – 液泡膜 （vacuolar membrane），结构与质膜类似 ②内质网 ? 由很多小管（tubule）组成，众多小管连在枕头套样的成对的膜（cisternae）上。 ? 分为糙面内质网和光面内质网 糙面内质网 – 上有许多称为核糖体的小颗粒 光面内质网 -上有许没有核糖体 ?核糖体也存在于细胞溶质，叶绿体和线粒体中 核糖体与mRNA连成一块，称为多聚核糖体，是蛋白质合成（翻译）的场所，还合成甾醇和磷脂。 ? 细胞器（organelle），包括质体、线粒体、高尔基体、核糖体、溶酶体等 ③叶绿体 ? 是光合作用的器官，是植物细胞的特有质体之一。 ? 呈扁圆形，直径数微米，每个叶肉细胞中有数十个叶绿体。 ? 外膜-包被（envelope），内部-类囊体（thylakoid）系统 ? 类囊体膜组成 - 蛋白质、类脂、核糖核酸（RNA）、色素 ? 色素：叶绿素类：a、b；类胡萝卜素类-胡萝卜素（carotines） 叶黄素（xanthophylls） ④线粒体 ? 粒状、棒状、丝状或有分枝的细胞器 ? 呼吸作用中的柠檬酸循环和电子传递均发生在线粒体内。 ? 主要功能 – 进行三羧酸循环、电子传递和氧化磷酸化作用。 2) 细胞核 分为核膜、核仁、染色质、核液 3) 液泡 ? 植物细胞的95%以上的体积，充满了水溶液 ? 作用 – 维持细胞和整个植物体的紧张度和刚硬度，增大了细胞和整个植物的表面积，以便于从外界吸收水分、无机养分，二氧化碳和日光。