12基因工程的基本操作程序 教案.docVIP

课题 1.2基因工程的基本操作程序 （ 教案 ） 教学目的 l．简述基因工程原理及基本操作程序2．尝试设计某一转基因生物的研制过程 教学手段 多媒体辅助教学 课前预习： 江苏农科院开展“转基因抗虫棉”的科技攻关研究，成功地将某种能产生抗虫毒蛋白细菌80％以上。分析 (1)抗虫基因之所以能接到植物体内去，原因是。 (2)“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力，这表明棉花体内产生了抗虫的物质。这个事实说明，害虫和植物共用一套，蛋白质合成的方式是的。 (3)“转基。 ④方式指数扩增：2n ⑤原理：DNA复制 思考：PCR技术与生物体内DNA复制相比，有何异同？ 思考：人工合成的目的基因不含启动子和终止子，是否可表达蛋白质？ 基因表达载体的构建 表达载体的组成： 目的基因+启动子+终止子+标记基因 表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中存在，并遗传给下一代，是目的基因表达和发挥作用。 思考：启动子是否就是起始密码子？终止子是否就是终止密码子？ 将目的基因导入受体细胞 1.将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌转化法 ①农杆菌的特点： Ⅰ。易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物无感染力。 Ⅱ。农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上 阅读P12内容，思考为什么农杆菌对单子叶植物无感染力？ ②转化：目的基因插入Ti-质粒的T-DNA 进入农杆菌 导入植物细胞 维持稳定和表达 阅读P12-13 了解基因枪法和花粉管通道法 （2）基因枪法——微弹轰击法 （3）花粉管通道法 阅读P13内容，归纳相关知识点： 2.将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射技术 （2）操作程序：目的基因表达再提提纯——取卵——显微注射——受精卵发育——新性状的动物 3.将目的基因导入微生物细胞 思考：为什么一般不用动物细胞做受体细胞，而常用微生物细胞做受体细胞？ （1）微生物的特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少。 （2）转化：Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 目的基因的检测和鉴定 学生阅读P14内容，归纳相关知识点： 1.检测: (1)方法：DNA分子杂交技术——DNA探针 抗原、抗体杂交 个体水平检测 演示DNA分子杂交图解 （2）内容： 检测转基因生物染色体上DNA上的目的基因 检测目的基因是否mRNA 检测目的基因是否翻译蛋白质 2．鉴定：个体生物学水平鉴定、抗病鉴定等 引发思考：抗虫棉可以用何方法检测目的基因是否表达？属于何水平上的鉴定法？ 典型例题： 【例l】下列关于DNA文库和基因组文库的说法中，不正确 的是 ( ) A．NA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因 B．如果某种生物的DNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 C．DNA文库中的基因都没有启动 D．一种生物的DNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种 2】资料显示，近10年PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规实验手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制()，在很短的时间内，将DNA扩增几百万甚至几十亿倍，使实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答： (1)加热至94的目的是使DNA中的键断裂，的作用来完成的。 (2)当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶2条DNA分子，此，遵循的原则是。 (3)请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处： ②PCR技术的原料为脱氧核苷酸，转录的原料是核糖核苷酸； ③二者反应时的催化酶不同（其他答案合理合理也行）。 (4)Taq酶的特点是 ( ) A．耐强酸 8．耐强碱 C．耐高温 D．最适温度37℃ 3】(2008·高考山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农法。 (3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用技术，该技术的核心是和。(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射作探针进行分子杂交检测，又要方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。1．基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因。正确的操作顺序是 ( ) A．③②④① B