二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜的形态学影响.DOCVIP

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内 膜的形态学影响 MO MBffi 李冰冰 北京中医药大学东直Q医脘北哀菡大学 a的从形态学角度探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜的影响。 方法将56只C57小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、阿司匹林组、二补 助育汤低、中、高剂量组，每组8只。用吲哚美辛建立胚胎着床障碍动物模型，小 鼠妊娠第5日下午脱颈椎处死，计算各组小鼠妊娠率及胚胎着床位点数;光学显 微镜下观察各组小鼠f宫内膜形态结构;透射电子显微镜下观察超微结构、胞饮 突表达情况，并计算胞饮突评分。结果（1）模型组平均着床位点数（1.8±2.1） 明显低于空白组（8. 1±4.2） （P0. 05）:中药中、高剂量组平均着床位点数（分 别为62. 5%, 75.0%）明显高于模型组（P0. 05）:与补佳乐组和阿司匹林组间无 统计学差异。（2）光学显微镜下形态学观察:正常组内膜间质疏松、腺体和血管 丰富、腺体扩张;模型组内膜变薄或消失、腺体和血管减少;二补助育汤各剂量组、 补佳乐组、阿司匹林组内膜均有改善，以二补助育汤屮剂量组与正常组最接近。 （3）电子显微镜下超微结构观察:空G组子宫内膜上皮细胞及细胞器结构清晰； 模型组细胞破坏严重甚至局灶性坏死，线粒体膜不完整、嵴结构消失，胞质中较 多空泡样变，核糖体和内质网明显减少;二补助育汤各剂量组、补佳乐组、阿司 匹林组细胞及细胞器有不同程度破坏，与模型组相比有明显改善。（4）胞饮突： 空闩组胞饮突丰富，绒毛较少;模型组绒毛丰富，但胞饮突很少;二补助育汤各 剂量组胞饮突较模型组丰富，见少量绒毛;补佳乐组和阿司匹林组可见少量胞饮 突，较模型组增加，绒毛表达稀疏。（5）胞饮突评分:模型组胞饮突评分 （1.1 ±0.3）较空白组低（2. 5±0. 7） （P0. 05）;中药中剂量组（2. 3±0.9）、 阿司匹林组（2.0±0.7）评分高于模型组（P〈0.05）,亦高于补佳乐组 （1.3±0.5） （P0.05）。结论二补助育汤能够促进子宫内膜发育及胞饮突，从 而提高子宫内膜容受性，有利于胚胎着床。 关键词: 二补助育汤;胚泡着床障碍;了宫内膜容受性;形态学;胞饮突; 除胚胎质量外，子宫内膜容受性是影响ART成功的重要因素 U1，如何提高子宫内膜容受性成为近年相关研宄的焦点和难点问题。二补助育 汤m是北京中医药大学东直门医院名老中医肖承惊教授治疗子宫内膜容受性低 下的经验方，前期临床研宄表明m，该方药能改善患者临床症状、增加子宫内 膜厚度，提高再次体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)成功率;前期实验研宂表明［4-5］，该方药通过干细胞生长 因子(stem cell factor, SCF)、同源框基因等靶点改善子宫内胶容受性。为 了从形态学角度探讨该方药对子宫内膜容受性的影响，我们进行了以下实验研 究。 1材料与方法 1.1实验动物 选择6飞周龄SPF级C57雌性小鼠56只，未交配过，雄性证明有生育能力，雌 性体质量(20±2) g,雄鼠体质量(25±2) go由北京维通利华实验技术有限公 司提供。小鼠饲养环境温度为(22±2) °C,湿度为12/12 h光照/暗循 环，可以自由获取食物和饮水。本动物实验严格按照北京中医药大学东直门医院 实验动物管理与监督委员会的指导原则进行，并获得医院动物伦理委员会的批 准。 1.2药物 1.2.1二补助育方 由补骨脂、骨碎补、巴戟天、桑寄生、川断、川牛膝等药物组成，颗粒制剂购置 于北京屮医药大学东直门医院门诊药房。用0.5%羧甲棊纤维素钠加热溶解，边 加热边搅拌，使其均匀。浓缩药液浓度（含生药量）分别为1.5g/mL、3g/mL、 6 g/m L 3种浓度，放入4°C冰箱保存。 规格1 mg/片，由法国DELPHARM Lille S. A. S.制药公司生产。取1. 5 mg放在研 钵屮研碎，溶于50 m L的5 g/L羧甲基纤维素钠屮，搅拌均匀，制成浓度为0.03 g/L溶液。 1.2.3阿司匹林肠溶片 规格100 mg/片,由德国Bayer S. p. A.制药公司生产。取500 mg放在研钵中研 碎，溶于50 m L的5 g/L狻甲基纤维素钠中，搅拌均匀，制成浓度为10 mg/m L 溶液。 1.2.4吲哚美辛油栓 规格100 mg/粒，由北京双吉制药有限公司生产。溶于100 m L麻油中配制成浓 度为1 g/L的汕剂。 1.3试剂与仪器 体积分数4%多聚甲醛、2. 5%戊二醛均购白北京索莱宝科技有限公司；光学显微镜 （型号BX60）为日本Olympus公司产品；透射电子显微镜（型号H-7650）为日本 Hitachi公司产品。 1.4模型建立、分组及给药 1.