[理学]第七章蛋白质合成.ppt

第九章 蛋白质生物合成和翻译后加工 9.1 参与翻译的主要生物大分子的结构与功能 9.2 翻译的一般性质 9.3 翻译的详细机制 9.4 蛋白质翻译后的定向与分拣 What are needed for Protein Synthesis? ribosome mRNA tRNAAA Amino acids Initiation, elongation and release factors Energy (GTP) 9.1 参与翻译的主要生物大分子的 结构与功能 核糖体 mRNA tRNA 氨酰-tRNA合成酶 核糖体中的rRNA 原核30S亚基中16S rRNA含有反SD序列,可与mRNA 5’的SD互补 大亚基23S rRNA具有肽基转移酶活性 核糖体的功能部位 A位点（或称 acceptor site）可以进入 氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。 P位点(或称供位，donor site) 是被肽基 酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占据。 E位点(Exit site) 脱酰tRNA(deacylated- tRNA)短暂地占据。 肽酰转移酶活性部位 mRNA结合部位 多肽离开通道 翻译辅助因子的结合部位 多核糖体 (polyribosome /polysome) 一个mRNA分子上结合有多个核糖体分子，形成多核糖体。每个核糖体单独完成一条完整的多肽链的合成。 mRNA tRNA 携带氨基酸到核糖体 通过反密码子与密码子的相互识别进行遗传解码 tRNA的结构：三叶草型的二维结构 各种tRNA 含有73-93个碱基 受体臂负责携带特异的氨基酸； T?C 臂负责与核糖体上的 rRNA识别结合； 反密码子臂负责与mRNA上的密码子识别和配对； D环有几个二氢尿嘧啶； 可变环促进三维结构形成。 不同的tRNA有自己特殊的规律携带特定的氨基酸 mRNA密码子通过识别tRNA上的反密码子来规定相应氨基酸的顺序。 起始tRNAfMet 在原核生物中，掺入蛋白质多肽链 的第一个氨基酸是甲酰甲硫氨酸， 它是由一个特定的tRNA所携带的---即起始tRNA . tRNAfMet进入核糖体的P位点。 甲酰化修饰封闭了氨基酸，防止它与上游氨基酸形成肽键。 tRNAfMet不会解码内部的甲硫氨酸密码子. 起始tRNA与识别编码区内AUG密码子的tRNA在结构上有所不同，但都是由同一种氨酰tRNA 合成酶所识别。 氨基酸活化形式氨酰tRNA 氨酰tRNA合成酶aaRS 每一种氨基酸都有一种aaRS 。约有20种aaRS. I类：将氨基酸 (Leu, Ile, Val, Arg, Cys, Met, Glu, Gln, Tyr, Trp) 转移到tRNA3?端腺苷的2 ?羟基上,再 切换到3?羟基上 II类：将氨基酸 (Ser, Thr, Ala, Gly, Pro, His, Asp, Asn, Lys, Phe) 转移到tRNA3?端腺苷的3?羟基上 20种氨酰tRNA合成酶的功能相同，但序列同源性 低，结构相差很大。 同工tRNA : 由同种氨酰tRNA合成酶识别，接受同种 氨基酸的不同tRNA。 aaRS对载荷氨基酸的鉴别—动力学校对 化学校正 9.1 参与翻译的主要生物大分子的 结构与功能 核糖体: 原核反SD序列, A P E位点 mRNA: 原核SD序列 tRNA: 起始tRNAfMet 氨酰-tRNA合成酶: 两种校对方式 9.2 翻译的一般性质 氨基酸的活化、起始、延伸、终止与释放四个阶段. 5’-3’阅读mRNA, N端-C端合成肽链 三联体密码 反密码子与密码子的相互识别决定多肽链上氨基酸的顺序 反密码子与密码子相互识别摆动假说 遗传密码 (genetic code) 遗传密码的破译 遗传密码的性质 遗传密码的破译 遗传密码： 指DNA中核苷酸顺序与多肽链中氨基酸顺序的对应关系。 三联密码的验证： 1961年Crick 和Brenner.S，用原黄素（吖啶类药物，使DNA插入或缺失一个碱基）诱变大肠杆菌T4噬菌体，产生加字突变和减字突变。发现只有同时三个移码（插入一个核苷酸）的突变株才能产生回复突变，表明三个核苷酸决定一个氨基酸。 遗传密码的破译 无细胞蛋白质合成系统的建立 1961年，Nirenberg建立，将细胞裂解液离心，用DNase去除模板，加入人工合成的mRNA模板。 The Genetic Code Deciphering poly(U) poly(C) poly(A) poly(G) 按比例加入2种核苷酸混合的多