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天香丹干预冠心病秽浊痰阻证病人血浆 miR-126表达水平变化研究 郭龙龙安冬青刘伟孙龙飞 新疆医科大学中医学院 R的研究血浆miR-126在冠心病秽浊痰阻证病人的变化及天香丹的干预作用。 方法收集冠心病病人40例及非冠心病病人20例，米集入院后24h内的清晨空 腹静脉血标本，冠心病病人口服天香乃JSd后清晨采集空腹静脉血标本，以 miR-39为参照基因，miRNeasy Serum/Plasma Kit试剂盒提取血浆总microRNA, 反转录成cDNA,并用SYBR Green T实时荧光定量PCR反应检测血浆中 microRNA-126的相对表达量，分析microRNA相对表达量各组屮的变化及其临床 应用价值。结果非冠心病组血清中miR-126相对表达量0.86 (0.81°. 90):冠心 病秽浊痰阻证基础治疗组血清中miR-126相对表达量1. 10 (0. 991. 20):冠心病 秽浊痰阻证基础治疗+天香丹组血清中miR-126相对表达量0.71 (0.61°.81)。 与非冠心病组比较，冠心病秽浊痰阻证基础治疗组miR-126表达量显著上调， 差异有统计学意义(Z=-4. 166，P=0. 001);冠心病秽浊痰阻证基础治疗+天香丹 组miR-126表达量差异无统计学意义(Z=-l. 880, P=0. 06);与基础治疗组比较, 冠心病秽浊痰阻证基础治疗+天香乃组miR-126表达量明显下调，差异有统计学 意义(Z=-4. 139, P=0.001) o依据miR-126在冠心病秽浊痰阻证病人与非冠心 病血清中表达量的不同，利用受试者工作特征受试工作特征(ROC)曲线分析， 曲线下面积(AUC) =0.886 (95%CI: 0.796°. 976, P=0. 001),敏感性为 72. 5%,特 异性为95.0%。结论在冠心病秽浊痰阻证病人血清中miR-126呈现高表达，根 据ROC分析结果达到临床应用价值，是冠心病秽浊痰阻可选的诊断分子标志物， MiR-126在天香丹干预后表达量下降，说明miR-126有可能在冠心病发病过程中 具有保护作用。天香丹可能通过干扰m i c roRNA，继而影响靶mRNA的降解和翻译, 治疗冠心病。 关键词： 冠心病;秽浊痰阻证;天香丹;miR-126;胸痹; 冠心病 是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型，故冠心病的发生与动脉粥样硬化 （AS）的形成过程密切相关。冠心病形成机制有多种，现公认的是在各种危险因 素（高血压、高血脂、高血糖、肥胖、吸烟、感染等）的影响下，血管内皮细胞 和平滑肌细胞产生过度的慢性炎性增生，导致动脉粥样硬化，发生心血管事件 ［2］omicroRNA （miRNA）是一组生物进化过程中高度保守的小RNA，不参与编码， 但在基因转录及转录后起到调控细胞增殖、分化、凋亡等作用［3-4］。通过降解 mRNA或抑制蛋白质翻译而调控棊因的表达。大量研究表明:miRNA与心血管疾病 的发生、发展密切相关［5-6］。miRNA可通过调节内皮细胞结构及功能，抑制炎 症反应及内皮细胞增殖、迁移、凋亡等参与动脉粥样硬化，预防冠心病m。 miRNA作为疾病诊断及治疗的研宄已经成为近期研宄的热点，近年来大量相关 研究发现miR-1-2、miR-208、miR-499、miR-126等都有可能成为心肌梗死的生 物学标志物，有研宂表明miR-126为血管內皮细胞表达最丰富的microRNAMo 本研宄观察冠心病秽浊痰阻证病人血浆miR-126的表达水平变化以及天香乃的 干预作用。 1资料与方法 1.1 一般资料 选取新疆医科大学第四附属医院收治的40例病人，按病人症状、体征心电图、 心肌酶谱、心脏超声、冠状动脉造影结果以及中医四诊合参，冠心病秽浊痰阻证 基础治疗病人20例，年龄（57±11）岁；冠心病秽浊痰阻证基础治疗+天香丹治 疗病人20例，年龄（55±12）岁。使用促凝管收集40例病人血液标木，分別定 为冠心病秽浊痰阻证基础治疗组和冠心病秽浊痰阻证基础治疗+天香丹组。另选 取我院同期非冠心病病人20例血液样本作为对照组，男9例，女11例，年龄 （5 2土1 0）岁。3组年龄比较无统计学意义（P=0.079）。所有血液样本均在收 集后3h内处理，处理方法:于低温离心机中以4°C，1 200r/min离心lOmin。为 进一步去除细胞碎片，离心后将上层血清移至一个新的EP管，再次进行离心， 4aC条件下以12 OOOr/min离心5min。将再次离心后的上清液进行分装后 （500 UL/管）保存于_80°C冰箱。保存待用。 1.2主要试剂与仪器 miRNeasy Serum/Plasma Kit 试剂盒、反转录试剂盒 miScript II RT Kit 和 miScript S