小麦分子染色体工程技术转移小麦外援抗病基因(minimizer)教学幻灯片.pptVIP

Haynaldia villosa 6VS/6AL SCAR-1400 普通小麦—簇毛麦易位系6VS/6AL 6VS/6AL Haynaldia villosa Translocaton 6VS.6AL X Chinese Spring Irradiating female gametes (on spikes) before pollinating 2~3 days by 60Co-?-rays 1600~2240 Rad M1 X Chinese Spring M2 用 ?-射线辐射 6VS/6AL整臂易位系成熟 雌配子诱导小片段易位 One breakage Two breakage One breakage Use addition or substitution line (with a whole alien chromosome) as basic materials Whole arm Translocation Many intercalary translocation, terminal translocation and deletion with different size of 6VS were induced through female gamete irradiation conducted on 6VS.6AL translocation line Intercalary translocations Terminal translocations Deletions of 6VS 6VS小片段中间插入易位NJ2-2高抗小麦白粉病 H.V 苏3 中国春 NJ2-2 扬5 92R137 抗小麦白粉病小片段中间插入易位系及Pm21的定位 6VS 6VL 6AS6-740 FL:0.00-0.45 CINAU18-723 FL:0.00-0.45 CINAU16-1065 FL:0.35-0.45 6BD28-386 FL:0.35-0.45 6DS38-730 FL:0.35-0.45 CINAU15-902 FL:0.45-0.58 6VS19-381 FL:0.58-0.99 CINAU17-1086 FL:0.58-1.00 Pm21 小片段中间插入易位 携带目标基因，伴随不良基因少 高效表达 稳定性好，传递力强 易为育种家利用 不涉及转基因植物安全性问题 是进行外源基因定位、克隆和研究基因互作的有用遗传材料 ○ 1R-104 1R-18 1R-20 1R-40 1R-89 Sec-1 Lr26 Yr9 NOR Sr31 Centromere Masoudi-Nejad et al. (2002) Chromosome Res. 10: 349-357 含有多个有用基因的染色体区段的操纵 Pm8 ph1bph1b × Ph1bPh1b（异附加系、异代换系） Ph1bph1b × ph1bph1b (异附加系、异代换系) ph1bph1b（诱导部分同源染色体配对） 产生易位 PhIPhI × PhPh PhIPh PhI 呈上位性，抑制Ph 基因，促进小麦与外源染色体发生部分同源配对，在杂合状态即可起作用 利用染色体配对控制体系诱导小麦异易位系 利用染色体工程技术选育抗病易位系 抗白粉病基因 Pm21 的分离与克隆 抗白粉病基因 Pm21 的分离与克隆 Haynaldia villosa 由南京农业大学发现并导入小麦 国际小麦基因命名委员会定名 国际公认抗性最强，抗谱最广 具有我国自主知识产权 感病扬五 抗病易位系 抗病簇毛麦 感病突变体 基于差异表达筛选侯选克隆 mRNA差异显示 抑制性扣除杂交 基因芯片筛选 抗病材料中特异表达或增强表达的基因 筛选cDNA或TAC文库 RACE Northern杂交或RT-PCR 分析基因表达水平 Southern杂交 拷贝数、多态性分析 及染色体定位 克隆全长基因 转化、功能互补试验 克隆Pm21技术路线 Ta-LRR2基因的克隆 0h 6h 12h 24h 48h Ta-LRR2 Histone 3 以诱导不同时间的簇毛麦cDNA为模板进行的PCR电泳图 SSH库中筛选得到了一个具有抗病基因保守结构域LRR 的