[医学]南华大学 生物化学第10章复制.ppt

DNA聚合酶靠其大分子结构协调非共价（氢键）与共价（磷酸二酯键）键的有序形成。 嘌呤的化学结构能形成顺式和反式构型，与相应的嘧啶形成氢键配对，嘌呤应处于反式构型。 化学因素 三、突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移 (frame-shift) ——DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。 发生在同型碱基之间，即嘌呤代替另一嘌呤，或嘧啶代替另一嘧啶。 1. 转换 发生在异型碱基之间，即嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤。 2. 颠换 （一）错配 同义突变：密码子第三位核苷酸的碱基改变而不改变密码子的意义（仍为相同氨基酸的密码子）。 转换和颠换可能引起的突变效应有: CGA CGC 精氨酸 精氨酸 误义突变：碱基置换使一种氨基酸密码子变成另一氨基酸密码子。 无义突变：一个碱基的置换使代表氨基酸的密码子变成无义密码（即终止密码） CAA CGA 谷氨酰胺 精氨酸 终止密码 CGA UGA 精氨酸 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 HbA：N’ Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys HbS： N’ Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys 镰状红细胞贫血症 正常红细胞 （二）缺失、插入和框移 缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。 插入：原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。 缺失或插入都可导致框移突变 。 框移突变是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 缺失和插入可引起框移突变 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C 缺失C （三）重排 DNA分子内较大片段的交换，称为重组或重排。 由基因重排引起的两种地中海贫血基因型 四、DNA损伤的修复 修复(repair)：是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。 光修复 切除修复 重组修复 SOS修复 修复的主要类型 （一）光修复 光修复酶(photolyase) UV 光复活酶（photo-lyase): 识别嘧啶二聚体并与之结合形成复合物→在300～600nm可见光照射下，酶获得能量，将嘧啶二聚体的丁酰环打开，使之完全修复→光复活酶从DNA上解离。 （二）切除修复 是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 E.coli的切除修复机制 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 ATP （三）重组修复 损伤面太大而又不能及时修复的情况下DNA也可以进行继续复制,由错误的模板复制的子链带有错误甚至缺口.这时需要进行重组修复. 重组修复时需要重组修复蛋白如RecA,它发挥核酸酶活性将另一股正常的母链与缺口进行交换,以填补缺口. RecA （四）SOS修复 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 一、名词解释： 遗传中心法则；半保留复制；岡崎片段；逆转录 二、思考题 1. DNA复制的基本规律有哪些？ 2.试述DNA复制的基本过程和所参与的酶系。 3.试述参与DNA复制的酶、蛋白因子及其作用。 4.试述DNA损伤的原因、损伤修复的类型及切除修 复的基本过程。 本章重点内容小结 A：DNA-pol的外切酶活性切除错配碱基；并用其聚合活性掺入正确配对的碱基。 B：碱基配对正确， DNA-pol不表现活性。 （一）DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读 （二）复制