[生物学]生物化学——3蛋白质.ppt

第三章 蛋白质 3.1 氨基酸、多肽和蛋白质 3.2 氨基酸 3.3 多肽 3.4 蛋白质 3.5 蛋白质的结构 3.6 多肽的化学合成 2.??中性极性氨基酸（8种）： 侧链有极性，但不解离（即不带电荷），或仅极弱的解离，有亲水性。 3. 酸性氨基酸（2种）：天冬氨酸、谷氨酸 侧链有能解离的极性基团（ -C00H ），在中性溶液时显酸性，亲水性强。 4. 碱性氨基酸（3种） ：赖氨酸、精氨酸、组氨酸 侧链有极性基团，且解离，在中性溶液中显碱性，亲水性强。 赖氨酸：侧链有-NH2基。 精氨酸：侧链有胍基。 组氨酸：侧链有咪唑基。 紫外分光光度计的原理及应用 3、3 多 肽 2. 谷胱甘肽(glutathione, GSH) 习题 一般来说我们说20种常见氨基酸的平均相对分子量为128,( 20种氨基酸平均相对分子量128，某蛋白质相对分子量为4784，在形成该蛋白质时脱去的水的总分子量为720，那么肽链数为多少? 720即40个水，氨基酸总质量=4784+720=5504=128*43。即43个氨基酸脱40个水。即有3条肽链。所以 水分子数＝肽键数＝氨基酸数－肽链数 3.4 蛋 白 质 （1） 蛋白质形状 球状蛋白 纤维状蛋白 一、蛋白质的分类和性质 1、蛋白质的分类 （2）. 分子组成 简单蛋白 结合蛋白 清蛋白 球蛋白 谷蛋白 醇溶蛋白 精蛋白 组蛋白 硬蛋白 核蛋白 糖蛋白与蛋白聚糖 脂蛋白 色蛋白 磷蛋白 2、蛋白质的性质 （1）蛋白质的两性解离及电泳 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点 电泳：带电颗粒在电场中移动的现象。分子大小不同的蛋白质所带净电荷密度不同，迁移率各异，在电泳时可以分开。 1）. 自由界面电泳：蛋白质溶于缓冲液中进行电泳。 2）. 区带电泳：将蛋白质溶液点在浸了缓冲液的支持物上进行电泳，不同组分形成带状区域。 纸上电泳：用滤纸作支持物。 凝胶电泳：用凝胶（淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。 A. 圆盘电泳：玻璃管中进行的凝胶电泳。 + — B. 平板电泳：铺有凝胶的玻板上进行的电泳。 - + 上电极缓冲液 下电极缓冲液 样品槽 上样器 阴极 阳极 电泳 方向 聚丙烯酰胺凝胶板 几种重要的蛋白质电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS）：常用于蛋白质分 子量的测定。 等电聚焦电泳（isoelectric focusing，IEF） 通过蛋白质等电点的差异而分 离蛋白质的电泳方法。pH梯度以两性电解质ampholyte（脂肪族多胺和多羧同系物）在外电场作用下自然形成。 双向凝胶电泳two-dimensional electrophoresis  （2）蛋白质的胶体性质 布郎运动、丁道尔现象、电泳现象，不能透过半透膜，具有吸附能力 蛋白质溶液稳定的原因：1）表面形成水膜（水化层）； 2）带相同电荷（电化层）。 + + + + + + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的聚沉 （3）蛋白质的沉淀作用 1） 加高浓度盐类（盐析）：加盐使蛋白质沉淀析出 分段盐析：调节盐浓度，可使混合蛋白质溶液中的几种蛋白质分段析出。血清球蛋白（50%(NH4)2SO4饱和度），清蛋白（饱和(NH4)2SO4)。 3）加有机溶剂 6）加重金属盐 7）加生物碱试剂 单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀生物碱，称生物碱试剂。 2）等电点沉淀法：将蛋白质溶液的PH调至等电点，蛋白质 的溶解度最低，沉淀析出。 可逆沉淀 4）强酸强碱沉淀 5）加热沉淀 不可逆沉淀 抗体-抗原沉淀 （4）蛋白质的变性 天然蛋白质受物理或化学因素的影响，其共价键不变，但分子内部原有的高度规律性的空间排列发生变化，致使其原有性质发生部分或全部丧失，称为蛋白质的变性。 变性蛋白质主要标志是生物学功能的丧失。溶解度降低，易形成沉淀析出，结晶能力丧失，分子形状改变，肽链松散，反应