第7章：外源化学物致突变.ppt

(2) 移码突变：frameshift mutation 翻译开始时，从 mRNA 5’至3’方向，若有AUG出现，就称为一个开放的读码框架。读码框架内每3个碱基组成一个三联体，就是决定一个氨基酸的一个密码子。 ①概念：指发生一对或几对（3对除外）碱基的减少或增加，以致从突变点开始，密码子的阅读框架完全改变，转译成不正常的氨基酸。 ②后果：移码突变较易成为致死性突变。 4、碱基的化学结构改变和破坏 有些化学物质对碱基产生氧化作用，从而破坏或改变碱基的结构，有时还引起链断裂。 如亚硝酸盐，羟胺等，可使腺嘌呤和胞嘧啶转变为次黄嘌呤和尿嘧啶。 1. 光复活 光复活是一种依赖光的过程，它通过酶切下DNA上嘧啶二聚体，将毗连的嘧啶接回原结构上。 主要是针对紫外线损伤产生的胸腺嘧啶二聚体的修复。 主要过程： 光裂合酶（光复活酶）识别变型的地方，并和它结合，形成酶-DNA复合物。 吸收可见光，获得能量。 切断二聚体的两个C-C键。 DNA回复正常构型，酶释放。 2.“适应性”反应 鸟嘌呤O6位被烷化，易造成碱基错配。 机体有一种修复功能，主要依赖烷基转移酶作用，将鸟嘌呤O6位甲基转给蛋白质，O6甲基鸟嘌呤-DNA甲基化转移酶（MGMT）。这样，鸟嘌呤可恢复其正常的碱基配对特性。 3. 切除修复 切除修复是负责较大范围损伤的修复机制，它是一多步骤修复过程，分为3种: 核苷酸切除修复， 碱基切除修复。 错配修复 切除修复不仅存在于细菌，也存在于真核生物，但它们在某些细节上有差异。 4.SOS修复 呼救性修复，亦称SOS修复 “SOS”是国际上通用的紧急呼救信号。 SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称为错误倾向修复（error-prone repair），使细胞有较高的突变率。 　 5.复制后修复 5、复制后修复 （PRR） 复制后修复与前述的修复不同，例如，切除修复可使DNA链在结构上部分或全部恢复正常。PRR达不到这种目的，它只是通过填补损伤部位，使复制得以继续进行。 例如，当DNA分子中某一部位受伤后，复制照常进行，但在碱基延伸时，可跳过损伤部位，结果子链在受损伤的部位留下缺口。这时依靠重组蛋白RecA的核酸酶活性将另一股健康的母链与缺口部分交换，以填补缺口。同时，健康母链以对应的子链为模板复制复原。经过一轮复制后损伤链占DNA的1/4，不断复制后，这种损伤就不断被稀释掉。 2. 成套的观察项目 由于一种致突变试验通常只能反映一个或两个遗传学终点。故在实际工作中，需用一组试验配套进行检测。 遗传毒理学成套观察项目中试验人选的原则： 可靠的试验系统应包括5种类型的遗传学终点; 配套实验应包括多种进化程度不同的物种，如原核细胞、低等和高等真核细胞; 体内试验与体外试验配合; 生殖细胞与体细胞试验相结合。 用紫外线照射细菌，并在黑暗中培养。杀菌数与剂量成正比，如接触可见光（310~440nm），存活率大大提高。并能降低突变率，这是由于光复活酶催化嘧啶二聚体分解成为单体。 光裂合酶广泛存在于原核生物和真核生物体内，已在许多生物体中发现（细菌、真菌、人类、哺乳类），但这主要是低等生物的一种修复方式。 * * * （1）核苷酸切除修复 它始于内切酶如大肠杆菌的uvrABC切除核苷酸酶打开受损DNA的双链，在helicase作用下，除去含有受损的寡核苷酸链，在真核生物留下27-29个核苷酸长度的间隙，在细菌留下12-13个核苷长度的间隙。在DNA聚合酶如大肠杆菌DNA聚合酶I作用下，以对应的DNA链为模板，合成新DNA链，填补留下的间隙。最后由DNA连接酶封闭，恢复原有的DNA序列。 核苷酸切除修复是所有生物体内最常见的修复机制。 * 核苷酸切除修复的主要过程 Uvr A、B分别辨识、结合DNA损伤部位； Uvr C切除受损伤的寡核苷酸链； DNA聚合酶以对应的DNA链为模板，合成新链，填补间隙； 最后由DNA连接酶连接缺口。 * 着色性干皮病 In the E. coli：uvr ABC excinuclease. In human: 8 XP gene, XPA through XPG and XPV. * （2）碱基切除修复 由DNA糖基酶(DNA glycosylase)作用于受损的DNA，该酶可识别异常的碱基，通过切断碱基与脱氧核糖连接的键，使受损的碱基脱落，产生一个无嘌呤或无嘧啶位点，即AP位点。 AP内切酶将DNA链切断； 由聚合酶及连接酶作用完成修复过程。 * Figure 1. The general structure of nucleo