西索米星生物合成基因狊犻狊犐功能的研究-延边大学学报自然科学版.PDFVIP

第 卷 第 期 延边大学学报（自然科学版） ４２ ２ Ｖｏｌ．４２Ｎｏ．２ 年 月 （ ） ２０１６ ６ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹａｎｂｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ Ｊｕｎｅ２０１６ ｙ 文章编号： （ ） １００４４３５３２０１６０２０１３００６ 西索米星生物合成基因狊犻狊犐功能的研究  万云凤， 洪文荣 ， 石贤爱 　 　 （福州大学 生物科学与工程学院，福建 福州 ３５０１１６） 摘要：通过生物学试验，构建依纽小单孢菌 （ ）中 基因缺失工程 ＴＳ３８８犕犻犮狉狅犿狅狀狅狊狅狉犪犻狀狅犲狀狊犻狊ＴＳ３８８ 狊犻狊犐 狆 狔 菌，再通过分析其次级代谢产物的变化，揭示西索米星生物合成基因簇上 基因的功能 首先构建用于 狊犻狊犐 ． 狊犻狊犐 基因框内敲除的穿梭载体 ｐＫＴＩ３，经接合转移导入依纽小单孢菌 ＴＳ３８８中，通过影印筛选及 ＰＣＲ鉴定获得 功能缺失工程菌 （ ）工程菌经发酵，提取代谢产物，再经 及 分析，用以比较亲株与 狊犻狊犐 ＴＩ１１０２ 狊犻狊犐． ＴＬＣ ＭＳ △ 工程菌代谢产物结构的差异 结果显示：工程菌 代谢产物结构发生变化，不再合成西索米星，主要积累 ． ＴＩ１１０２ 中间代谢产物 ，由此证明了 基因参与了 到西索米星的 ， 双脱羟基作用 获得主产 ＪＩ２０Ａ 狊犻狊犐 ＪＩ２０Ａ ３′４′ ． ＪＩ ２０Ａ的工程菌为该类半合成药物提供了重要前导化合物． 关键词： 基因；依纽小单孢菌；生物合成； ， 双脱羟基 狊犻狊犐 ３′４′ 中图分类号：Ｑ９３３ 文献标识码：Ａ 　　　　　 犜犺犲犳狌狀犮狋犻狅狀犪犾犲狓犾狅狉犪狋犻狅狀狅犳狊犻狊犐犻狀 狆 狊犻狊狅犿犻犮犻狀犫犻狅狊狀狋犺犲狊犻狊犲狀犲犮犾狌狊狋犲狉 狔 犵  ， ， ＷＡＮＹｕｎｆｅｎ ＨＯＮＧＷｅｎｒｏｎ ＳＨＩＸｉａｎａｉ ｇ　 ｇ 　 （ ， ，