ABO血型鉴定SOP（手工法）.doc

xxxx医院 临床检验实验室 文件编号： XXXX ABO血型鉴定 版序：xxxx 页码：第1 页，共5 页 [测定原理] 根据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或／和抗—B。 [试剂和仪器] 1．批批检的抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清。 2．批批检的5 ％ A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注； 3．离心机，显微镜。 [标本收集与处理] 1，受检者血清； 2，枸缘酸钠抗凝血或未稍取血，受检者血液制成5 ％红细胞盐水悬液使用，制备方法见本节附注。 3，标本出现中度溶血者，为不合格标本，不能用于检测。 [操作步骤] 1．试管法 (1) 取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B分型血清各l滴（约50 ul）于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。 (2) 另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。 (3) 立即以1000r／min离心 3 min。 (4) 将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。 (5) 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。 xxxx医院 临床检验实验室 文件编号： XXXX ABO血型鉴定 版序：xxxx 页码：第2 页，共5 页 (6) 凝集强度判断标准 4十 红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。 3十 红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。 2十 红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。 1十 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。 土 镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。 MF 混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。 一 表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。 2．玻片法 (1) 取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清 l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。 (2) 另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B 细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。 (3) 将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15 min，先以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应；再在低倍镜下观察结果。 [结果判定] ABO血型正反定型结果 分型血清+受检者红细胞 受检者血型 受检者血清+试剂红细胞 抗-A 抗-B 抗-A十B A细胞 B细胞 O细胞 十 ─ 十 A ─ 十 ─ ─ 十 十 B