仪器分析第11章色谱分析导论.pptVIP

2.归一化法： 若试样中有n各组分，则组分i的百分含量为： 3.内标法： 在一定量的试样中，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析。根据被测组分和内标物的峰面积或峰高及内标物的质量，即可求得被测物的含量。 设： 组分i的质量为mi、试样质量为M、加入内标物的质量为ms 以内标物作基准物质，则 本章结束 2.理论塔板数（溶质平衡次数） 根据塔板理论假设，在每一块塔板上，溶质在两相间很快达到分配平衡，然后随着流动相按一个一个塔板的方式向前移动。对于一根长为L的色谱柱，溶质平衡的次数应为： 理论塔板数 色谱柱的柱效随理论塔板数n的增加而增加， 随板高H的增大而减小。 色谱柱分离混合组分的能力 3．塔板理论对色谱的解释： 第一，当溶质在柱中的平衡次数，即理论塔板数n 大于50时，可得到基本对称的峰形曲线； 第二，当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相 间的分配系数有微小差异，经过反复多次 的分配平衡后，仍可获得良好的分离； 第三，n与半峰宽及峰底宽的关系式为： 即在tR一定时，若色谱峰越窄，则n值越大，H越小，柱效能越高。 4.有效塔板数 注意：同一色谱柱对不同物质的柱效能是不 同的。当选用这些指标表示柱效时， 应指明对何种物质而言。 5.塔板理论的特点 ① 定量说明了溶质在色谱柱中移动的速率； ●成功点： ② 解释了流出曲线的形状； ③ 提出了计算和评价柱效能高低的参数。 ●不足点： ① 定性地给出板高的概念，却不能找出影 响板高的因素； ② 不能说明为什么在不同的流速下，可以 测得不同的理论塔板数。 二 速率理论： 速率理论指出：在色谱分离过程中，谱峰的扩 宽受涡流扩散、分子扩散和传 质阻力三个动力学因素的控制。 板高方程为： A、B、C —— 常数。A为涡流扩散项系数 B为分子扩散项系数 C为传质阻力项系数 —— 流动相的平均线速度； 一定时，只有当A、B、C较小时，板高H才能小，柱效才会高；反之，则柱效低，色谱峰扩张。 1.涡流扩散项（A） 变宽的程度由下式决定： A=2λdp ① A与填充物的平均直径dp和填充不规则因 子λ有关，与流动相的性质、线速度和 组分性质无关； ② 使用颗粒细和均匀的填料，采用均匀填 充，是减小涡流扩散和提高柱效的有效 途径。 2.分子扩散项（ ） 气体分子的分子扩散项系数B为： B=2γDg γ—— 弯曲因子。它表示柱填充物对分子扩散 的阻碍程度。 Dg—— 组分在气相中的扩散系数（cm2.s-1）。 Dg除与组分性质有关外，还与组分在气 相中的保留时间、柱温、柱压和载气的 性质等因素有关。 为减小分子扩散引起的色谱峰变宽，可采用： ① 用较高的载气流速； ② 使用相对分子量较大的载气； ③ 控制较低的柱温。 3.传质阻力项（Cū） 物质系统由于浓度不均匀而发生的物质迁移（从一相转入另一相）过程。 影响传质过程进行速度的阻力。 传质： 传质阻力： ① 气相传质阻力系数 Cg Cg——描述影响组分从气相转移到固定相表 面这一过程的传质速度的因素。 对于填充柱 ： 采用粒度小的填充物和相对分子量小的载气，可减小Cg值，提高柱效。 ② 液相传质阻力系数Cl Cl——描述影响组分在液相中传质速度的 因素 。 a.降低固定液含量，df减小，但容量因子k也 随之变小，对分离不利； b.固定液含量一定时，df值随载体的比表面积 增加而降低。因此，一般用比表面积较大的 载体来降低df值； c.提高柱温，Dl增大，但k值减小，故应控制 适当的柱温。 减小固定液的液膜厚度df，增大组分在液相中的扩散系数Dl，可以减小 Cl值。 4.范氏方程式（速率理论方程式： ） 选择色谱分离条件具有重要的指导意义。它可以说明固定相的填充均匀程度、粒度、液膜厚度、载气种类和流速等因素的变化对柱效和色谱峰展宽的影响。 §11—4 分离度 一、分离度Rs： 定义： 相邻两组分色谱峰保留值之差与该两组分色谱峰基线宽度平均值之比。 定义式： ① 当Rs＜1时，两色谱峰总是有部分重叠； ② 当Rs=1.0时，两色谱峰的分离程度可达 98%； ③ 当Rs=1.5时，两色谱峰的分离程度达 99.7%。 ④ 当Rs值更大时，分离效果更好，但会延长 分析时间，使色谱峰变宽，对分析反而不 利。 Rs=1.5为相邻两色谱峰完全分离的