辣椒红色素的分离提取及测定.docVIP

实验七 辣椒红色素的分离提取及测定 综述： 辣椒红色素为深红色粘性油状液体，是以辣椒为原料，用石油醚、丙酮、正己烷等有机溶剂提取得到的天然色素。主要由辣椒红素、辣椒玉红素、辣椒酮、辣椒红呋喃素、玉米黄质等化合物组成，，依据来源和制法的不同，因含有辣椒碱而具有不同程度的辣味。辣椒红素几乎不溶于水，可任意溶解于丙酮、乙酸乙酯、正己烷，易溶于乙醇，稍难溶于丙三醇。 紫外光可以使辣椒红素褪色，但辣椒红素对热稳定，160℃加热两小时几乎不褪色，Fe3+、Cu2+可使之褪色。pH对色素色度无影响。 辣椒红素 一、实验目的： 本实验为自主设计实验，要求学生几人一些小组，自己查阅文献、制定实验方案、在教师指导下讨论通过后进行实验。通过对辣椒红色素的提取、分离及测定，初步了解和掌握食品中某些成分的提取技术、分离技术以及测定方法，从而对食品有效成分的分析有比较系统的认识，为能灵活运用食品化学的研究方法打下良好的基础。 本次实验还拟通过这种方式，使同学们了解一个研究性试验的基本过程，从而提高对科学研究的兴趣，为今后创新性实验的开发奠定一定的能力基础，同时也在于培养大家团队协作的团队精神。 实验原理 辣椒红色素为脂溶性色素，选用适当的方法提取后，可采用不同的分离技术对色素进行分离。 三、实验材料与设备 1.材料：干红辣椒 2.试剂：石油醚、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、氯仿、甲醇、柱层析用硅胶、薄层层析用硅胶、0.5%羧甲基纤维素钠等。 3.设备：粉碎机、超声波清洗机、旋转蒸发仪、薄层层析板、柱层析、层析缸等。 四、实验步骤 1.色素的提取：称取1-2g干红辣椒，掰开去籽，放入粉碎机中粉碎。将粉碎好的粉末倒入一干燥洁净的三角瓶，加入50-100ml丙酮，用保鲜膜封口，并在保鲜膜上扎几个眼儿。将三角瓶放入超声清洗机20-30min，过滤后放入旋蒸瓶内旋蒸，直至完全蒸干。向内壁附着有辣椒红色素的旋蒸瓶内加入3-4ml左右的石油醚，轻摇将辣椒红色素溶解在石油醚中，最后把石油醚倒入小试管，密封好放入冰箱保存。 2.色素的粗分离：用柱层析法提取出的色素进行粗分离。???一定量的柱层析用硅胶加入层析柱中，装柱时要尽量均匀。剪一小块圆形滤纸放在柱子的顶端，轻压滤纸，使滤纸恰好完全平整覆盖在柱面上。用石油醚润湿柱子，直至石油醚从层析柱下端流出，期间一定要保持柱子上表面不干。石油醚从层析柱下端流出后，在柱子上端加入约0.5ml小试管中含有辣椒红色素的石油醚，待含有辣椒红色素的石油醚将近全部进入柱内后，用石油醚冲洗，少量多次，直至柱子上表面液体无色。然后开始向柱子中加入石油醚和丙酮的混合溶液（石油醚:丙酮=10:1）。期间可以根据不同色素分离的情况，适当改变石油醚和丙酮的比例，是辣椒红素与其他色素尽量分离开来。待到辣椒红素从柱子下端流下时，用一个干净的小烧杯将其收集起来，封口备用。 3.色素分离：首先制备薄层板。称取10-15g左右的薄层层析硅胶与研钵中，再向其中加入35-40ml左右的羧甲基纤维素钠，向一个方向搅拌，至黏稠状。保证其中没有未混匀颗粒或气泡。将活好的硅胶铺到载玻片上，铺均匀后晾干，然后在105°的烘箱内活化1h，将活化好的板放入干燥器中，备用。配置不同比例的层析液与层析缸中，用毛细管在薄层层析板上点上样品，放入层析缸内层析。观察并记录每种层析液的层析效果。 五、实验结果 薄层层析中每种层析液分离色素情况如下： 层析液：石油醚：丙酮=20:1 层析液：石油醚：丙酮=100:1 点样液：经柱层析的提取液 点样液：经柱层析的提取液 层析液：石油醚：乙醇=10:1 点样液：经柱层析的提取液 层析液：石油醚：丙酮=10:1 点样液：经柱层析的提取液 层析液：石油醚：乙醇 =10:1 层析液：石油醚：丙酮=10:1 点样液：未经柱层析的提取液 点样液：未经柱层析的提取液 丙酮比石油醚和乙醇都更有利于辣椒红色素中各色素的分离展开 六、思考题 1.除辣椒色素外，还有哪些色素的分离提取可以用到刚刚所采用的方法？ 还有绿叶菜中的叶绿素和胡萝卜中的胡萝卜素也可以用此法提取。 2.辣椒红素属于类胡萝卜素的一种，它是一种脂溶性色素，几乎不溶于水。它的热稳定性很好，但在紫外光下易分解，Fe3+、Cu2+可使之褪色。所以在提取、储藏及加工中应避免阳光的直射，不能用铜、铁等材质的的容器承装。 3.通过此次实验