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第五章-微生物的营养和生长
第五章 微生物的营养和生长 对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致,代谢旺盛、生长迅速、代时稳定,所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作种子,使微生物发酵的迟缓期缩短,提高经济效益。 代时(G,generation time): 单个细胞完成一次分裂所需的时间,即增加一代所需的时间。 影响代时的因素: 菌种; 营养状况; 培养温度。 在这一时期,细胞已经适应了新环境,代谢 活性最强,组成新的细胞物质最快,细胞数以几何 级数增加。 菌名 培养基 培养温度 代时 E. coli(大肠杆菌) 肉汤 37℃ 17min E. coli 牛奶 37 12.5 Enterobacter aerogenes(产气肠细菌) 肉汤或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 组合 37 29~44 B. Cereus(蜡状芽孢杆菌) 肉汤 30 18 B. thermophilus(嗜热芽孢杆菌) 肉汤 55 18.3 Lactobacillus acidophilus(嗜酸乳杆菌) 牛奶 37 66~87 Streptococcus lactis(乳酸链球菌) 牛奶 37 26 S. lactis 乳糖肉汤 37 48 Salmonella typhi(伤寒沙门氏菌) 肉汤 37 23.5 Azotobacter chroococcum(褐球固氮菌) 葡萄糖 25 344~461 Mycobacterium tuberculosis(结核分枝杆菌)组合 37 792~932 Nitrobacter agilis(活跃硝化杆菌) 组合 27 1200 温度对微生物的代时有明显影响: E. Coli 在不同温度下的代时 温度(℃) 代时(分) 温度(℃) 代时(分) 10 860 35 22 15 120 37 17 20 90 40 17.5 25 40 45 20 30 29 47.5 77 稳定期 特点:新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等 开始积累代谢产物 这时菌体产量达到了最高点。 细胞开始贮存各种储藏物:异染颗粒等 。 芽孢开始形成。 次级代谢产物开始合成。 稳定期出现的原因: (1) 营养物的耗尽(特别是生长限制因子),营养物比 例失调 (2) 酸、醇、毒素、H2O2等有害物质的积累 (3) pH、氧化还原电位 衰亡期 细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物,如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。芽孢菌的芽孢释放也发生在这一时期。 细胞呈现多种形态,有时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。 特点:衰亡的细胞数超过新生细胞数 在工业生产上常常通过补料、调节PH值、调节温度等措施,延长稳定期,以积累更多的代谢产物。 5.2.2.2 微生物的连续培养: 分批培养:(密闭培养) 将微生物置于一定容积的的培养基内,经过一段时间的培养,最后一次性的收获,称为分批培养。 连续培养:(开放培养) 如果在培养器中不断补充新鲜营养物质,并及时不断以一定的速度排出培养物(包括菌体及代谢产物),从理论上讲,对数期就可以无限延长。只要培养液的流动量能使分裂增殖的新菌数相当于流出的老菌数,就可以保证培养器中总菌量基本不变。基于此原理设计的,在微生物的整个培养期间,通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法,就称为连续培养。 连续培养类型 恒浊连续培养 恒化连续培养 恒浊连续培养 通过连续培养装置中的光电系统控制,不断调节新鲜培养基流入和培养物流出的速度,而使细胞培养物浊度保持恒定的,使细胞生长连续进行的一种连续培养方式。 在发酵工业中,为了获得大量菌体以及与菌体生长相平行的代谢产物时,效果较好。 恒化连续培养 控制培养基的流速恒定,使由于细胞生长而耗去的营养物及时得到补充,且某种营养物质的浓度基本恒定,从而保持细胞生长速率恒定,使生长“不断”进行的一种连续培养方式。 菌体的生长速率低于其最高生长速率(取决于限制性因子的浓度),但生长速率均一,能保持菌体密度的稳定。通常用于微生物学的研究。 生长速率的控制因子:一般是氨基酸、氨和铵盐等氮源,或是葡萄糖、麦芽糖等碳源或者是无机盐,生长
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