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【大学课件】实验2 LD50的测定
Review 半数致死量的意义 测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。 LD50的测定 一、测定LD50的常用方法: 1.??改良冠氏法:方法简单,计算简便。 2.? 序贯法(上下法):使用动物少,费时多,不适于作用慢的药物 3.?Biss法:设计严谨,结果可靠,是目前公认的最佳方法,但计算复杂,一般需借助于计算机或计算器才能进行计算。 二、实验步骤: (一)预试: 目的:找出LD0及LD100 。 方法: 每组用4只动物,分别给予10倍稀释的药液0.2ml/10g,再在4/4及0/4组的上下分别按0.14ml/10g、0.1ml/10g、0.07ml/10g、0.05ml/10g剂量递减或按0.28ml/10g、0.4ml/10g的剂量递增,直至找出较可靠的LD0及LD100。 (二) 正式实验:1.剂量分组: 在预试测得的LD0及LD100的剂量范围,按等比级数(一般按1:0.75-0.8)分成4-9个剂量组。 2.? 动物分组: 一般每组可用10只动物,按均衡随机化原则将动物分成4-9组。 3. 给药: 每组动物按相应的浓度0.2ml/10g给药。 4.观察: 给药后先密切观察12小时,以后每天观察1-2次,连续观察7天。 5.饲养: 每组动物应♀♂分笼饲养。 6.记录: 每组动物死亡情况(死亡数、死亡时间、死亡前症状);中毒情况(中毒症状、出现时间、消失时间)。 7. 统计计算: 求出LD50及其95%的可信限。 三、本次实验(自做) 改良冠氏法测定解磷定的LD50及其95%的可信限。 1.LD50的计算: 1)最小剂量组的死亡率为0%;最大剂量组的死亡率为100%时: LD50=lg-1〔Xm-i(∑p-0.5)〕 2)最小剂量组的死亡率大于0%而小于30%,或(和)最大剂量组死亡率小于100%而大于70%时: LD50=lg-1〔Xm-i〈∑p –(3-pm-pn)/4 〉〕 2.LD50的标准误:Sx50=i×√(∑p - ∑p2)/(n-1) 3.LD5095%的平均可信限: LD50±4.5×Sx50×LD50 (P=0.95) 说明: Xm:最大剂量组的剂量对数 i:相邻两组对数剂量的差值(大剂量组减小剂量组) Pm:最大剂量组的死亡率 Pn:最小剂量组的死亡率 P:各组死亡率 n:每组动物数 Summary 根据实验情况而定 选择分组组数及剂量比值简表 实验动物的均衡随机分组 1.首先将实验动物按性别分为两组 2.对两组动物分别进行称重、标号 3.按体重对动物进行分层 4.对每层的动物查随机号, 用随机号除欲分组数,按余数进入相应的组。 5.依次分完全部动物后,再进行调节,使各组动物数相等。 100个自然数的随机排列 * Tab. Tab. 7-8组 6-7组 9组 5-6组 6-8组 9组 10组 4组 5组 7-8组 9组 10组 3-4组 4-5组 5-6组 7-8组 9-10组 10组 ? 4组 5组 6组 8组 8-9组 3-4组 4-5组 5-6组 6-7组 7组 3-4组 4-5组 5-6组 6-7组 2左右 3左右 4左右 6左右 10左右 14左右 LD100/LD0= 0.9 0.88 0.85 0.8 0.75 0.7 0.65 0.6 剂量比(1:K)K= 返回 Back Tab. 89 99 92 11 07 82 29 59 88 64 65 42 87 10 46 61 68 67 63 70 36 79 30 05 75 52 16 57 90 15 95 12 79 45 18 33 94 78 83 58 39 24 71 09 50 22 13 40 27 00 17 85 62 28 06 21 25 98 53 04 44 02 31 48 81 93 66 47 52 51 01 74 41 96 69 88 60 97 34 49 72 43 80 57 35 64 85 20 08 23 76 19 11 84 91 36 73 86 03 26 1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 U=74 R=0.0659 Back
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