第3章基因工程生物制药.ppt

第三章 基因工程制药 基因工程的基础知识 基因的概念与特性 一、基因的概念: 　DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。 早期认为遗传物质是蛋白质，1944年Avery从肺炎链球菌转化实验证明是DNA。 二、基因的一般特性： ①基因可自我复制， ②基因决定蛋白质结构， ③基因可突变。 基因按功能分为： ①结构基因 ②调控基因 三、DNA的结构与性能 ⒈DNA的结构：四种核苷酸（A T C G）连接。 DNA二级结构双螺旋结构。 ⒉DNA的性质与功能 ①吸收光谱260 ②电场中泳动 ③变性 复性 杂交 DNA的复制与表达 一、DNA的复制： 　　半保留复制 二、基因表达 ⒈转录：在RNA聚合酶的催化下以DNA　　为模板合成mRNA的过程。 转录后加工： 剪切：除去内含子 加帽：5’加m7Gppp 加尾：3’加poly（A） 二、翻译：以mRNA为模板,tRNA作为运载工具,将活化的氨基酸在核糖体上合成蛋白质的过程。 ⒈分为三个阶段： ①起始 ②延长 ③止 基因表达 ⒉翻译后的肽链加工 肽链切断 ①羟基化 ②糖基化 ③磷酸化 ④乙酰化 140年前，Mendel在捷克莫勒温镇一个修道院里沉醉于豌豆杂交实验，也许根本就没有想到，他提出的遗传因子在半个世纪后被Morgan定义为基因 1944年Avery证明了基因的物质基础是DNA 50年代初Watson和Crick又揭示了DNA的分子结构 70年代初，DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达 140年前，Mendel在捷克莫勒温镇一个修道院里沉醉于豌豆杂交实验，也许根本就没有想到，他提出的遗传因子在半个世纪后被Morgan定义为基因 1944年Avery证明了基因的物质基础是DNA 50年代初Watson和Crick又揭示了DNA的分子结构 70年代初，DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达 50年代初Watson和Crick又揭示了DNA的分子结构 70年代初，DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达 今天，人们在超市货价上可以买到保质期很长的转基因土豆，“多利”克隆绵羊走进实验室，基因工程正在使整个人类生活方式发生重大变革。 2000.6.26宣告人类基因组“工作框架图”绘制完毕。 目前还有许多有价值的微生物，动物，植物的测序工作正在进行中。 /genomics/ 二、基本概念 基因工程的基本定义： 基因工程（Genetic Engineering）原称遗传过程。从狭义上讲，基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。 基本概念 基因工程的基本定义： 供体、受体和载体称为基因工程的三大要素，其中相对于受体而言，来自供体的基因属于外源基因。 基本概念 基因工程的基本定义： 除了少数RNA病毒外，几乎所有的基因都存在于DNA结构中，而用于外源基因重组拼接的载体也都是DNA分子，因此基因工程也称为重组DNA技术（DNA Recombination）。 另外，DNA重组分子大都需在受体细胞中复制扩增，故还可将基因工程表征为分子克隆或基因的无性繁殖（Molecular cloning）。 基本概念 基因工程的基本定义： 广义的基因工程定义为DNA重组技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。 基本概念 基因工程的基本定义： 上游技术指的是外源基因重组、克隆和表达的设计与构建（即狭义的基因工程）； 而下游技术则涉及到含有重组外源基因的生物细胞（基因工程菌或细胞）的大规模培养以及外源基因表达产物的分离纯化过程。 基本概念 基因工程的基本定义： 广义的基因工程概念更倾向于工程学的范畴。值得注意的是，广义的基因工程是高度统一的整体。上游DNA重组的设计必须以简化下游操作工艺和装备为指导思想，而下游过程则是上游重组蓝图的体现与保证，这是基因工程产业化的基本思想。 三 、理论基础 不同基因具有相同的物质基础； 基因是可切割的； 基因是可以转移的； 多肽和基因之间存在对应关系； 遗传密码是通用的； 基因可以通过复制把遗传信息传给