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- 2018-03-04 发布于浙江
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[高三理化生]SDS—聚丙烯酰胺垂直平板电泳
SDS—聚丙烯酰胺垂直平板电泳 一 实验原理 十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂。由于SDS分子本身带有负电荷,能够与蛋白质的疏水区相结合,使蛋白质伸展和解离,从而使蛋白质呈一致的强负电荷。当采用加SDS的聚丙烯酰胺进行电泳时,利用聚丙烯酰胺凝胶的分子筛效应,可以进行蛋白质分子量的测定。 在用该方法进行分子量的测定中,是利用某些已知分子量的指示蛋白质与经SDS处理后解离成单链的蛋白质样品进行电泳比较,根据蛋白质的电泳迁移率,在一定的分子量范围内与分子量的对数所呈的线形关系,就可以测出单链样品蛋白质的分子量。用该方法测得的是蛋白质亚基的分子量。 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳可以采用园盘电泳的形式,也可以采用垂直平板电泳的形式,其原理相同,操作步骤也大致相同。另外SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳亦分为不连续系统和连续系统。本实验采用垂直平板以不连续系统的SDS—聚丙烯酰胺凝胶方式进行电泳。垂直平板电泳的优点在于在一块凝胶平板上可以同时进行不同样品的电泳。因此条件一致,更加便于比较。 二 实验目的与要求 (1)、学习与了解SDS—聚丙烯酰胺垂直平板电泳的方法 (2)、通过对某一蛋白质样品的分子量测定,了解和掌握该方法的 分子量测定技术。 三 实验仪器与器材 3-1、实验仪器: (1)、垂直平板电泳槽装置(套)
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