第10章 其他有机毒物及其代谢产物的测定.pptVIP

L/O/G/O 第八章 其他有机毒物及其代谢产物的测定 亢延飞 第一节 五氯酚 理化性质 五氯酚（pentachlorophenol，PCP）为白色晶体，易溶于碱性水溶液，易溶于有机溶剂和植物油。 五氯酚钠（sodium pentachlorophenate）的工业品为浅黄色鳞片状晶体，有臭味，易溶于水、醇和丙酮，不溶于苯和石油。五氯酚钠水溶液呈碱性，加酸即析出五氯酚。五氯酚钠溶液可与铜、铁、锌、金、汞等金属生成具有色泽的不溶性五氯酚金属盐。五氯酚及其钠盐在日光照射下均易分解。 二 代谢与生物监测指标 五氯酚及其钠盐主要用作木材、皮革、纺织品、纸张和绳索等的防腐剂，以及甘蔗、菠萝和稻田的除草剂等。工作方面，除生产者难免要与之接触以外，工人施用五氯酚及其钠盐药液对木材进行防腐处理时，也可以通过皮肤或呼吸道吸收而引起中毒。在生活中，误食、误饮被药液污染的食物或水源水，则可以造成中毒事故。 五氯酚及其钠盐经皮肤、呼吸道和肠道吸收。进入人体的五氯酚主要以原型或与葡萄糖苷酸结合的形式从尿液中排出，少量代谢成四氯化氢醌也从尿液中排出。另有一小部分结合或为结合的五氯酚从粪便中排出 。 五氯酚及其钠盐属高毒类。五氯酚及其钠盐对皮肤、眼和呼吸道粘膜有刺激作用，直接接触后可引起局部损害。某些人群流行病原调查提示接触五氯酚溶液后患鼻癌、鼻咽癌和软组织肉瘤的危险度增高。 测定尿中五氯酚及其盐的含量，便可以推测其接触量，并对五氯酚中毒诊断和鉴别有参考价值。 五氯酚及其钠盐进入体内吸收后，血中和尿中含量都增高，但尿中浓度高于血中浓度，所以，尿样常用作接触五氯酚的生物监测指标试样。 样品采集及保存 采集现场尿样或晨尿，将尿液收集在清洁的硬质玻璃瓶或聚乙烯瓶中，可用于直接测定游离五氯酚。 尿中五氯酚的测定 尿中五氯酚及其钠盐的测定方法有分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法。分光光度法主要有4-氨基安替比林分光光度法，亚甲蓝分光光度法和藏红花分光光度法。但分光光度法灵敏度较低，干扰较多。 气相色谱法包括直接气相色谱法和衍生化气相色谱法。由于五氯酚沸点高，蒸气压小，不易气化，给直接气相色谱法带来困难，故常需先将五氯酚或五氯酚钠与重氮甲烷作用生成衍生物五氯苯甲烷后，再作气相色谱测定。这样，使操作步骤比较繁琐，而且使用的试剂苯、重氮甲烷有致癌危险。 高效液相色谱分析法测定尿中五氯酚及其钠盐是较好的方法。 （一）4-氨基安替比林分光光度法 原理 尿中五氯酚或五氯酚钠在弱酸性条件下随水蒸气蒸馏出来，吸收在氢氧化钠溶液中，生成的五氯酚钠在铁氰化钾（氧化剂）存在下，与4-氨基安替比林作用生成蓝色安替比林染料，用二甲苯提取，在580nm波长处比色定量。 样品处理 取尿样, 加适量柠檬酸溶液和蒸馏水进行蒸馏，馏出液用100mL刻度烧杯接收。接收烧杯内先加入少量蒸馏水和氢氧化钠溶液。将冷凝管出口进入接收烧杯溶液中。当馏出液达到约100mL时停止蒸馏，将馏出液加水至100mL，待测。 3 样品测定 取馏出液20mL于50mL带塞试管中，加入pH = 6的柠檬酸盐缓冲液1.00mL和0.4%4-氨基安替比林溶液1.00mL，混匀。加入10%铁氰化钾1.00mL，混匀。快速加入二甲苯5.00mL，用力振摇后静置分层，取上层提取液转入比色杯，在5800nm波长处测定吸光度，按标准曲线法定量。 (二) 亚甲蓝分光光度法 1 原理 在弱碱性溶液中，五氯酚钠可与亚甲蓝定量结合生成有色化合物，萃取后的波长660nm或590 nm处进行分光光度法测定。 2 样品处理 取尿样50 mL置于蒸馏瓶中，加盐酸1 mL和数毫升饱和碳酸氢钠溶液，放数粒玻璃珠，然后进行蒸馏，待用。 3 样品测定 取10 mL馏出液于比色管中，加入亚甲蓝应用液1 mL，三氯甲烷3 mL，混合，静置分层，取三氯甲烷层于比色管中，在波长660 nm或590nm处测定吸光度，按标准曲线法定量。 （三）气相色谱 1 原理 尿样中五氯酚用正己烷提取，再用重氮甲烷甲基化试剂作用生成五氯苯甲醚，然后进行气相色谱测定。将样品与标准品在相同条件下的色谱峰的保留时间进行比较，确证尿样中是否含五氯酚，如含五氯酚，采用标准曲线法以峰高定量。 3 样品处理和测定 取尿样于具塞离心管中，加氢氧化钠溶液碱化后再加正己烷，振摇后，除去正己烷。酸化处理后的水相，正己烷提取，再加重氮甲烷，混合数分钟，静置，加入甲醇水溶液混合，分层后取正己烷层，测定。 （四）高效液相 1 原理 尿样中加入盐酸后，置于沸水中，使结合型的五氯酚水解，并在碱性条件下用二氯甲烷提取部分干扰物，然后在酸性条件下用乙醚提取尿中五氯酚，浓缩后，高效液相色谱法测定。 3 样品处理和测定 取尿样于消化瓶