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第11章 种质保存 (2009.02.07)
第11章 种质保存 第11章 种质保存 本章主要内容: 种质资源保存的一般概念 低温保存 超低温保存的定义及保存方法 本章教学目的与要求 1、了解种质资源保存的一般概念及意义 2、掌握低温保存和超低温保存技术 3、冷冻保存的应用前景 第一节 种质资源保存的一般概念 种质保存的方式: 离体保存的意义: 可使一些无性繁殖作物种质资源低温长期保存,避免资源的丢失。 节省土地和劳力,方法简单,花费少并能在保存中脱毒。 一旦利用可快速繁殖;也利于种质交换。 第二节 常温保存 温度:20~25℃ 第三节 常低温和低温保存 方法: 第四节 超低温保存 超低温保存:也叫冷冻保存,指在-196℃的液氮超低温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态,在适宜条件下可繁殖,再生出新的植株,并保持原来的遗传特性。 一、冷冻的方法 二、提高冷冻后细胞或组织存活率的方法 1、植物材料的性质 2、冷冻前的预处理 3、解冻方法 4、重新培养 超低温保存的程序 组织材料 三、冷冻保存后细胞和器官活力的检测 四、冷冻保存的应用前景 1、长期保存种质的遗传稳定性。 2、长期保存去病毒的种质。 3、保持稀有珍贵及濒危植物的种质资源。 4、保持不稳定性的培养物,如单倍体。 5、保持培养细胞形态发生的能力。 6、防止种质衰老。 7、延长花粉寿命,解决不同开花期和异地植物杂交上 的困难。 8、冷冻解冻过程可筛选抗逆新品种。 9、便于国际间的种质交换。 本章小结: 1、了解种质资源、种质保存的一般概念 2、低温保存和超低温保存技术冷冻的方法 (1)快速冷冻法 (2)冷冻前的预处理 (3)解冻方法 (4)重新培养 3、冷冻保存后细胞和器官活力的检测 4、冷冻保存的应用前景。 * * 植物组织培养学 大 家 好 ! 第11章 种质保存 第11章 种质保存 种质:指亲代通过生殖细胞或体细胞传递给 子代的遗传物质 种质保存:利用天然或人工创造的适宜环境,使个体中所含有的遗传物质保持其遗传完整性,高活力,能通过繁殖将遗传物质传递下去。 第11章 种质保存 第一节 种质资源保存 的一般概念 原地保存 异地保存 第一节 种质资源保存 的一般概念 改变培养基中营养物质的浓度 改变培养的环境条件:降低氧的含量 降低无机盐浓度 提高渗透压:甘露醇、蔗糖 增加生长调节物质 覆盖矿物油 降低氧压 特点:保存时间短,1年转3~5次 第11章 种质保存 常低温:0~15℃ 低温:-80~0℃ 特点:简便易行,投资小.1年转1~3次 低温保存 改变培养基成分 改变培养条件 第11章 种质保存 第11章 种质保存 冷冻的4种方法 快速冷冻法 慢速冷冻法 分步冷冻法 干燥冷冻法 第四节 超低温保存 悬浮培养或继代培养 预培养 低温锻炼 冷冻防护剂 快速解冻法 慢速解冻法 第四节 超低温保存 预处理 加冷冻防护剂0℃ 慢冻法-40℃或-100℃ 预冻法-70~-20℃ 快冻法 种质库(-196℃) 迅速解冻(34~40℃) 再培养 细胞生长、植株再生 第四节 超低温保存 再培养法 测定存活率 重新生长细胞(或器官)数目 解冻的(或器官)数目 存活率= ×100% 第四节 超低温保存 第四节 超低温保存 第11章 种质保存
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