以质粒为载体的基因治疗现状.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 摇 圆园园圆 允怎灶；怨（圆）：员猿苑 耀员猿怨 悦澡蚤灶 允 悦葬灶糟藻则 月蚤燥贼澡藻则 ·员猿苑 · ［文章编号］摇 员园园苑鄄猿愿缘载（圆园园圆）园圆鄄园员猿苑鄄园猿 以质粒为载体的基因治疗现状 孙摇 丽综述，刘定干审阅（中科院上海生物化学和细胞生物学研究所，上海摇 圆园园园猿员） ［摘摇 要］摇 近年来，质粒载体在基因治疗中的应用已引起人们的关注，并取得了很大进展。与病毒载体相比，质粒的优点为： 制备简单，快捷，成本低廉，用于基因治疗较安全，并能与其它合成载体联合使用。本文就近年来质粒载体的发展，对质粒的 设计，质粒导入机体的方法和途径、体内分布，和质粒抗癌药物的疗效进行了综述。 ［关键词］摇 质粒载体；阳离子脂质体；肿瘤 ［中图分类号］摇 匝苑愿圆摇 摇 摇 摇 ［文献标识码］摇 粤  摇 实现肿瘤基因治疗的关键是要使用高效安全的基因导 带正电荷的脂质体和带负电荷的质粒阅晕粤，经简单混合 入系统。病毒载体，如逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关 后，在静电引力作用下形成阳离子脂质体辕 质粒复合物。阳 病毒载体、疱疹病毒载体、痘苗病毒载体［员］等，虽然能使基因 离子脂质体辕 质粒复合物在转染哺乳动物细胞时具有很大优 高水平导入和表达，但所引发的宿主炎性免疫反应较强，可 势，其特征为： 脂质体制备方法多样，结构设计简单； ① ② 能通过重组产生致病的野生型病毒，并且生产成本甚高。这 可转染多种类型的细胞（正常的或病变的内皮细胞、巨噬细 胞、和肿瘤细胞）； 与其他非病毒阅晕粤转移系统比，易与 些缺点加速了人们对新的、无毒的、低成本的非病毒基因载 ③ 细胞结合并被细胞内吞，具有较高的转染率； 免疫原性和 体的研究。 ④ ［圆］ 生物毒性低，体内使用安全； 可运载大小不同的质粒 质粒作为非病毒载体在基因治疗中的应用前景引人 。 ⑤ 阅晕粤，其容量大大超过其他基因载体； 能抵抗核酸酶，延 当质粒内插入具有治疗作用的目的基因及所有顺式调控元 ⑥ 件，如启动子、增强子及沉默子序列和转录处理信号时，就可 缓基因降解。 以用于哺乳细胞的转染；当含有一个病毒复制子时，即可指 阳离子脂质体导入介质系统由阳性脂质和中性的辅脂 导质粒在靶细胞核中扩增。同时质粒阅晕粤 与重组病毒相 质组成。辅脂质能促进阅晕粤从阳离子脂质体中释放。对于 比，具有操作简单，可容纳的插入序列大，整合和扩散的危险 体内基因转染，辅脂质的选择应依据给药途径［猿］。气管和组 性小，制备容易、生产成本很低等优点。另外质粒阅晕粤 的抗 织给药时，选用含阅韵孕耘（双油酰磷脂酰乙醇胺）的阳性脂质 原性低，可多次投药而不引起如病毒载体那样的严重免疫反 体可提高阅晕粤 的转染率，阅韵孕耘 能和复合物形成六面体，利 于复合物与转染细胞膜的融合，促进 ［源］ 应。因此，近年来以质粒为载体的基因治疗研究很多，尤其 阅晕粤 的释放 ；而由静 是使用阳离子脂质体为导入介质的质粒系统。 脉给药时，用悦匀韵蕴（胆固醇）代替阅韵孕耘 能使基因转染效率