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L-谷氨酰胺 L-谷氨酰胺分子量146，有两个氨基，化学名称为：L-2-氨基戊二酸-酰胺，是体内最重要的氨基酸。 生工0903 辛鹏 20092513311 生产研究： 对于谷氨酰胺这类药用氨基酸，国外产量十分可观。日本1990年上升至1200吨，并逐年增长。用发酵法生产谷氨酰胺，日本发酵浓度达60g/L，韩国50g/L，日本味之素报道谷氨酰胺提取总收率为40%。 国内天津轻工业学院曾选育一株产谷氨酰胺菌，发酵浓度最高达到40g/L。国内目前只有少数几家用化学法生产谷氨酰胺，主要供实验室作为生化试剂，我国在药用谷氨酰胺生产上尚属空白。 生产方法：化学法、发酵法、酶合成法 微生物发酵法机理：发酵条件的变更创造了有利于合成氨酰胺的环境，谷氨酸生产菌内的Gln合成酶活力增加，而催化分解为谷氨酸的Gln酶活力收到抑制，从而Gln大量积累生成，谷氨酸的生成量减小。另一方面，由于细胞外环境的影响，Gln易从细胞中分泌出来，积累在发酵液中。而谷氨酸渗透性减小，滞留在细胞内，从而使转化得以实现。 微生物发酵法优点：反应条件温和，操作简便，产品原料丰富且成本低，无公害，能完成一些化学合成难以完成的反应，产品纯度高，适于作为药物使用。 L-谷氨酰胺生产工艺： 一.主要菌种： L-谷氨酰胺生产菌种、谷氨酸棒杆菌、假单胞菌属的荧光 杆菌、链霉菌 二.种子培养： 种子扩大培养： 斜面培养——一级种子培养——二级种子培养——三级种子培养——发酵培养 不同时期培养基组分及作用： 固体培养基：牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂粉 种子培养基：葡萄糖 玉米浆 磷酸二氢钾 七水硫酸锌 发酵液培养基：葡萄糖 玉米浆 磷酸二氢钾 七水硫酸锌 硫酸铵 碳酸钙 一水硫酸锰 无水硫酸铜 作用：氮源：有机氮源提供生长因子及生物素碳源：种子培养期间少加葡萄糖用于生长即可，碳源过量会产酸，使菌体提前衰老。磷酸盐：过量抑制6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性，菌体生长好，产物产量低，过低，糖代谢受抑制，糖耗慢。镁：己糖激酶、柠檬酸脱氢酶和羧化酶的激活剂，并能促进葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力钾：许多酶的激活剂。促进糖代谢。钾盐多有利于产酸，钾盐少有利于生长。锰：许多酶的激活剂注：培养温度稳定在32℃，保存酶活力 菌种诱变：解除反馈调节——结构类似物抗性突变株的选育切断支路代谢——营养缺陷型的选育选育温度敏感型突变株呼吸抑制抗性突变株磷酸化抗性突变株抑制能量代谢抗性突变株弱化HMP途径——莽草酸缺陷型 选育谷氨酰胺的类似物（蛋氨酸亚砜）抗性突变株 三.发酵过程控制： 左图是谷氨酸发酵工艺图 L-谷氨酰胺是在谷氨酸发酵工艺基础上，在谷氨酰胺合成酶作用下生产L-谷氨酰胺。 谷氨酰胺合成酶，缩写为GS。为在ATP的存在下使氨与谷氨酸结合生成谷氨酰胺的酶，受谷氨酰胺和AMP抑制。 以谷氨酸与谷氨酰胺的发酵工艺不同具体分析。 碳源：葡萄糖 糖蜜（含Fe离子）氮源：无机氮 铵盐 尿素（与玉米浆有协同作用） 氨水有机氮提供生长因子和生物素 生物素：生物素过多时，菌体生长繁殖速度快，耗糖多，PH降低（产生乳酸），谷氨酰胺产量低；不足时，菌体生长缓慢，耗糖慢，发酵周期长，谷氨酰胺产量低 温度：最适生长温度不一定是最适生产温度  最适生产温度也是酶最适温度 生长温度（30-32℃） 生产温度（30±0.5℃） PH：主要影响酶的活性和菌的代谢。 最适生长PH（7.0） 最适生长PH（谷氨酸发酵时 7.0-7.5；谷氨酰胺发酵时 6.6-69） 在中性和微碱性条件下（PH7.0-8.0）积累谷氨酸，在酸性条件下积累谷氨酰胺 NH4+的影响：在发酵前期，很大程度上影响菌体生长和繁殖；在发酵中期，主要影响产胺速度，高浓度的NH4+保证了谷氨酰胺的合成反应顺利进行。较低浓度首先影响菌体的生长和繁殖，但是过高的浓度对谷氨酰胺有抑制作用，同时高浓度的硫酸根离子会给后面的提取带来困难 溶氧量：氨基酸发酵过程中，供氧不足会积累乳酸等副产物，菌体减少。 通过通气搅拌将溶