人类外周血培养和染色体核型分析教材_课件.pptVIP

人类外周血培养和染色体核型分析 人类外周血培养和染色体核型分析 要求： 了解人外周血培养及染色体制备方法。 掌握人类染色体核型非显著分析的方法。 正确识别各组染色体及判断性别。 人类染色体核型（男性）示意图 主要仪器： （1）? 超净工作台 （2）? 大容量低速离心机 （3）? 二氧化碳培养箱和电热恒温培养箱 （4）? 电热恒温干燥箱 （5）? 水浴锅 （6）? 天平 （7）? 显微镜 人类外周血培养和染色体核型分析 试剂： 培养基（含80% RPMI-1640营养液，20%胎牛血清，每5mL中加1-2%植物血球凝集素和各500单位的青、链霉素） 低渗液（0.075M KCL） 固定液（新配制的甲醇:冰醋酸为3:1） 生理盐水（0.85% NaCL） 人类外周血培养和染色体核型分析 0.5mg/mL秋水仙素溶液（以无菌的生理盐水配制） Giemsa染液（1g Giemsa粉不断添加少量甘油充分研磨，甘油总量为60mL,倒入烧杯中于55-60oC水浴加热2小时，冷却后加入60mL甲醇，混匀后室温放置2-3天过滤，在棕色瓶中长期保存。 * Giemsa工作液（10%）需要新鲜配制（以蒸馏水或1/15M 磷酸缓冲溶液配制） 人类外周血培养和染色体核型分析 0.0125%胰蛋白酶（效价1:250，以生理盐水配制） 0.2M HCL 2.5% Ba(OH)2：新鲜