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[生物学]生物反应动力学
生物反应动力学及过程分析 KS的数值很低,一般为0.1-120mg/L,在对数期,营养物浓度远远大于KS, μ μmax或为常数, 在对数生长末期,一旦营养物浓度接近 KS,就转入稳定期。 最大比生长速度在工业上有很大的应用价值,它随微生物和培养条件不同而不同,在一个范围内波动,一般来说,细菌大于真菌,同一细菌,T升高, μmax变大, 营养物不同,也会发生改变。 对于不进行中间添加新培养基的操作,由物料衡算可得: (8-73) (8-72) (8-71) 在较大的稀释率范围内,随着反应器级数的增加,细胞的比生长速率越来越小,这是因为反应器中的限制性基质浓度越来越低的缘故。 (2)比速率 ●比生长速率:反映细胞生长特性的重要参数。 8.2.1 得率系数和比速率 (8-32) ●基质的比消耗速率: (8-33) ●产物的比生产速率: (8-34) 8.2.2 培养过程的化学计量关系 (1)在基本培养基中:细胞所消耗的碳源,用于产生能量、合成细胞成分及产物, (8-35) 维持代谢所消耗的碳源与细胞浓度和时间成正比,而用于供生长所需的碳源消耗则与生长量有关,即 (8-36) (8-37) 式中,m——维持系数;Y’G——用于生长的能量得率系数。 同化所消耗的碳源中的碳转化成细胞成分,因此 (8-38) 式中,α1——碳源的含碳量; α2——细胞含碳量。 ●如果无产物生成:则△SP=0,将式(8-36)、(8-37)和(8-38)代入式(8-35),整理得 (8-39) 因而: (8-40) 式中, (8-41) Y X/S、YG和Y’G的差别 Y X/S:以消耗的全部碳源为基准的细胞得率系数; YG:以用于生长所消耗的碳源为基准的细胞得率系数 Y’G:以用于生长中产生能量的那部分碳源为基准的细胞得率系数 ●如果有产物生成:由式(8-35)可得 (8-42) 式中,YP=-△P/ △ SP——产物的最大得率。 (2)在复合培养基中:培养细胞,可以认为培养基中的有机氮源用于合成细胞物质,碳源仅用来提供能量。 当无产物生成时: (8-43) 当有产物生成时: (8-44) 8.3 分批培养 培养过程中,培养液中的细胞浓度、基质浓度和产物浓度不断变化,但往往表现出一定的规律。 8.3.1 分批培养中细胞的生长 在稳定期开始以后的不同时期内出现,由于自溶酶的作用或有害物质的影响,使细胞破裂死亡。 衰亡期 随着营养物质的消耗和产物的积累,微生物的生长速率下降,并等于死亡速率,系统中活菌的数量基本稳定。 稳定期 细胞活力很强,生长速率达到最大值且保持稳定,速率大小取决于培养基的营养和环境。 对数生长期 为适应新环境的过程,细胞个体增大,合成新的酶及细胞物质,细胞数量很少增加,微生物对不良环境的抵抗力降低。当接种的是饥饿或老龄的微生物细胞,或新鲜培养基营养不丰富时,延迟期将延长。 延迟期 细胞特征 生长阶段 分批培养过程中各个生长阶段的细胞特征 对数生长期 倍增时间(doubling time) 细菌 0.25~1 h 酵母 1.15~2 h 霉菌 2~6.9 h (8-45) (8-46) 减速期 Monod方程 (8-47) Monod研究了基质浓度与生长速度的关系 ———Monod方程(1949) μ 米氏方程: μ:菌体的生长比速 S:限制性基质浓度 Ks:半饱和常数 μmax: 最大比生长速度 μ 单一限制性基质:就是指在培养微生物的营养物中,对微生物的生长起到限制作用的营养物。 Monod方程的参数求解(双倒数法): 将Monod方程取倒数可得: 或: 这样通过测定不同限制性基质浓度下,微生物的比生长速度,就可以通过回归分析计算出Monod方程的两个参数。 例:在一定条件下培养大肠杆菌,得如下数据: S(mg/l) 6 33 64 153 221 μ(h-1) 0.06 0.24 0.43 0.66 0.70 求在该培养条件下,求大肠杆菌的μmax,Ks和td? 解:将数据整理: S/μ 100 137.5 192.5 231.8 311.3 S 6 33 64 153 221 μmax,=1.11 (h-1); Ks=97.6 mg/L td=ln2/ μmax=0.64 h 稳定期 衰亡期 细胞表观比生长速率为0,细胞浓度达到最大,保持恒定。 如果这是由于某种营养物质的耗尽所致,而且在细胞的生长过程中细胞的得率系数Y
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