[高一理化生]12 基因工程的基本操作程序.pptVIP

第一步，反转录酶以RNA为模板合成一条与RNA互补的DNA单链，形成RNA-DNA杂交分子。 第二步，核酸酶H使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解，使之变成单链的DNA。 第三步，以单链DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链，形成双链DNA分子。 (1)从基因文库中获取目的基因 什么叫基因文库？ 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库 （3）通过DNA合成仪用化学方法人工合成 2、表达载体的组成 启动子 终止子 目的基因 标记基因等 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射法 （2）程序： 7．请据图回答下列问题 （1）基因工程的核心步骤是 。 （2）利用 技术可以获得大量的目的基因。该技术 利用 的原理，将基因的核苷酸序列不断 加以复制，使其数量呈指数增长。 （3）图中 位于基因的首端，是 识 别和结合的部位。抗生素基因的作用是作 为 ，用于鉴别受体细胞中是否导入了目 的基因。 （1）基因表达载体构建 （2）PCR；DNA双链复制 （3）启动子；RNA聚合酶；标记基因 2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 3）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 练习 4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 练习 5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C 练习 6、应用基因工程技术诊断疾病的过程中须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是 A．用于检测疾病的医疗器械 B．用放射性同位素或荧光分子等标记的 DNA分子 C．合成β-珠蛋白的DNA D．合成苯丙羟化酶的DNA片段 B 金太阳新课标资源网 * 1.2 基因工程的基本操作程序 DUCK179制作 基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 1、目的基因主要是指______________________ 编码蛋白质的结构基因 2、获取目的基因的常用方法有哪些? （3）人工合成 （1）从基因文库中获取 （2）利用PCR技术扩增 基因文库 基因组文库 部分基因文库 （cDNA文库） 基因组文库与部分基因文库的关系 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ③条件：_________ 四种脱氧核苷酸 、 ___________ 、 ___________. ②原理：__________ ④特点：以_____方式扩增，即____（n为扩增循 环的次数） ⑤结果（应用）： 多聚酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 模板 一对RNA引物 热稳定DNA 聚合酶（Taq酶） 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 (2)利用PCR技术扩增目的基因 ⑥过程： a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板 在热作用下，_____断裂，形成___________ b、退火（复性55℃-60℃）：系统温度降低，引 物与DNA模板结合，形成局部________。 c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的