2微生物学讲义 第二章PPT.ppt

4. 荧光显微镜(fluorescent microscope) 一、显微镜的种类及原理 4. 荧光显微镜(fluorescent microscope) 一、显微镜的种类及原理 透射电子显微镜(transmission electron microscope) 6. 扫描电子显微镜(scanning electron microscope) 五、选择培养分离 抑制大多数其它微生物的生长 微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化： 使待分离的微生物生长“突出”； 直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养 五、选择培养分离 1. 利用选择平板进行直接分离 待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制 高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌； 五、选择培养分离 P17 1. 利用选择平板进行直接分离 待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物 颜色反应：分离特定的菌株； 牛奶平板：分离蛋白酶产生菌； 利用特定细菌的滑动特点进行 分离纯化； 五、选择培养分离 P17 2. 富集培养 从自然界中分离到所需的特定微生物 制定特定的环境条件 使仅适应于该条件的微生物旺盛生长 待分离微生物在群落中的数量大大增加 2. 富集培养 富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理 条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微 生物的需要。 （如尼古丁降解菌的分离、筛选） 1、根据需要，从自然界分离出特定已知或未知微生物种类； 2、分离培养在特定环境中能生长的未知微生物； 菌株B5 在LB固体培养基、尼古丁固体培养基上的生长Growth of strain B5 on LB and nicotine culture medium 嗜尼古丁节杆菌(Arthrobacter nicotinovorans） 、根癌农杆菌C58(Agrobacterium tumefaciens C58） 和根癌农杆菌B5(Agrobacterium tumefaciens B5） 在尼古丁固体培养基上的生长 六、二元培养物 P17 培养物中只含有二种微生物，而且是有意识的 保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。 病毒和宿主细胞； 纤毛虫、变形虫和粘细菌； 微生物学实验室的常规操作程序 第二节 显微镜和显微技术 一、显微镜的种类及原理 二、显微观察样品的制备 几个基本概念：P20 放大 分辨率 反差 被观察物越小，放大倍数应越大，否则难以看清！ 能辨别两点之间最小距离的能力 被观察物区别于背景的程度 与显微镜的自身特点有关，但也取决于进行显微观察时对显微 镜的正确使用及良好的标本制作和观察技术，这就是显微技术。 一、显微镜的种类及原理 1、普通光学显微镜 2、暗视野显微镜 3、相差显微镜 4、荧光显微镜 5、透射电子显微镜 6、扫描电子显微镜 7、扫描隧道显微镜 一、显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜（brightfield microscope) 复 式 显 微 镜 简单显微镜 一、显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜（brightfield microscope) 光学显微镜一般配置的最大放大倍数是多少？为什么？ 如何实现光学显微镜一般配置的最大放大倍数？其原理？ 目镜：10 ~ 15 ╳；物镜： 100 ╳；总放大倍数1000~1500 ╳； 使用油镜，即在100 ╳物镜和载玻片之间滴加香柏油； 0.5 l 分辨率（最小可分辨距离）= ———— n sin q 1. 普通光学显微镜（brightfield microscope) 分辨率与所用 波长成反比！ 1. 普通光学显微镜（brightfield microscope) 0.5 l 分辨率（最小可分辨距离）= ———— P22 n sin q n sin q（NA）：数值孔径，是物镜性能的重要指标 q为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和工作距离