基因工程》课件((新人教版选修3).ppt

7.天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： ⑴将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____________， 用___________将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子， 下一步将该DNA分子___________，以完成工程菌的构建。 ⑵若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检 测方法是____________；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成 淀粉酶，可采用___________________检测。 限制酶 DNA连接酶 导入酵母菌 DNA分子杂交 抗原一抗体杂交 8.利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术 2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目 通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本 低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗 原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用 生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答： ⑴在基因工程中，A表示????????????? ，如果直接从苏云金杆 菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点 是??????????? ，B表示????????????????? 。 目的基因? 重组DNA 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且在特定的位点上切割DNA分子? ⑵在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目 的基因，并采用____???? 技术对目的基因进行了扩增，然 后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组 载体的构建过程中需要的工具酶有___________________ ⑶基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基 因表达载体至少包括哪些部分?????????????? ??。 ⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是 采用????????? ，在②过程中一般采用?????????????? ， 受体细胞一般是????????????????? 。 PCR 限制酶、DNA连接酶 目的基因、启动子、终止 子、标记基因 农杆菌转化法 显微注射技术 受精卵 基因工程专题复习 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。 1、来源： 2、作用： 3、结果： 形成两种末端 “分子手术刀” ——限制酶 黏性末端 平末端 G A A T T C G C T T A A A A T T C G 限制酶切割ＤＮＡ分子示意图 C T T A A G 思考 　　要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 两个切口，四个黏性末端。 黏性末端 黏性末端 什么叫平末端？ “分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶 １.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。 1.下图为DNA分子的切割和连接过程。 ⑴EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切 割位点是 与 之间的 键。切割结果产 生 。 限制 GAATTC G A 磷酸二酯 黏性末端 ⑵不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶是 酶 此酶的作用是在 与 之间形成 键。 DNA连接 G A 磷酸二酯 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？ 双链 单链 在两DNA片段之间形 成磷酸二酯键 将单个核苷酸加 到已存在的核酸 片段上，形成磷 酸二酯键 都能形成磷酸二酯键 1. 载体的必要条件 能自我复制，或能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 有一个至多个限制酶切割位点 具有某些标记基因 2.常用的载体：质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒。  “分子运输车” —载体 3.载体的作用：携带外源DNA片段进入受体细胞。 特点：可在细胞中自我复制或整合到染色体DNA 上随染色体DNA进行同步复制。 基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序主要包括 四个基本步骤： 1）目的基因的获取 2）基因表达载体的构建 3）将目的基因导入受体细胞 4）目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 (一)目的基因主要是______________________ 编码蛋白质的结构基因 （二）获取目的基因的常用方法有哪些? 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 1、从基因文库中获取目的基因