CN107400717-CN201710739425-水貂源性成分的恒温荧光法检测引物组、试剂盒及检测方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107400717 A (43)申请公布日 2017.11.28 (21)申请号 201710739425.8 (22)申请日 2017.08.25 (71)申请人 广州迪澳医疗科技有限公司 地址 510663 广东省广州市广州高新技术 产业开发区科学城科丰路31号华南新 材料创新园G7栋401号 申请人 广州迪澳生物科技有限公司 (72)发明人 高芳　申洪杰　黄曦　郭吉原　 孙春华　 (74)专利代理机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 44205 代理人 胡辉 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) C12N 15/11(2006.01) 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 (54)发明名称 水貂源性成分的恒温荧光法检测引物组、试 剂盒及检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种水貂源性成分的恒温荧 光法检测引物组，包括外引物OF和外引物OB、内 引物IF和内引物IB、环引物和分子信标。同时公 开了一种水貂的检测方法，包括如下步骤：(1)提 取待检样品DNA；(2)恒温基因扩增反应：利用恒 温检测引物组对待检样品进行恒温扩增，扩增时 将检测管放置在可提供恒温及荧光检测的仪器 上，每30～60s采集一次荧光信号；(3)结果判断： 根据有无“S”型扩增曲线判断阴阳性结果，有“S” 型扩增曲线为阳性结果，反之为阴性结果。该检 测方法具有检测简便，克服恒温检测技术的不 A 足，提高了检测准确度和灵敏度，具有广阔的应 7 用前景。 1 7 0 0 4 7 0 1 N C CN 107400717 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.水貂的恒温检测引物组，包括外引物OF和外引物OB、内引物IF和内引物IB、环引物和 分子信标，其核苷酸序列分别如下所示： 外引物OF：5’-GATCTCATCCGACTCTCC-3’(SEQ  ID NO.1)； 外引物OB：5’-GGATAGAATAGCTAGTGTT-3’(SEQ  ID NO.2)； 内引物IF：5’-AGGGGTGAAAGGGGATTTTGTCATGAAACAGGATCCAATAAC-3’(SEQ  ID NO.3)； 内引物IB：5’-TATCCTACTACTGGCTATGCACTACACCGCAGTATAATTGTCTG-3’(SEQ  ID NO.4)； 环引物：5’-AATCAGATGGGATTCCAG-3’(SEQ  ID NO.5)； 分子信标：GACCTGCTTGTGTTGGCTACTGAGGAGCGCAGGTC(SEQ  ID NO.6)。 2.一种水貂的恒温检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的恒温检 测引物组。 3.根据权利要求2所述的水貂的恒温检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括： DNA聚合酶、恒温反应液、阳性对照和阴性对照。 4.根据权利要求3所述的水貂的恒温检测试剂盒，其特征在于，恒温反应液由10mM  dNTP、150mM MgSO 水溶液组成，按体积比计，dNTP：MgSO 水溶液＝(7～9)：(2～4)。 4 4