CN107478756-CN201710696689-王老吉凉茶指标性成分的分离纯化方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107478756 A (43)申请公布日 2017.12.15 (21)申请号 201710696689.X (22)申请日 2017.08.15 (71)申请人 广州王老吉药业股份有限公司 地址 510450 广东省广州市白云区广花二 路831号 (72)发明人 郑荣波　祝晨蔯　黄晓丹　伍柏坚　 林朝展　和海龙　林德晖　刘主洁　 方广宏　 (74)专利代理机构 广州华进联合专利商标代理 有限公司 44224 代理人 郑彤 (51)Int.Cl. G01N 30/06(2006.01) G01N 30/02(2006.01) 权利要求书2页 说明书17页 附图1页 (54)发明名称 王老吉凉茶指标性成分的分离纯化方法 (57)摘要 本发明涉及一种王老吉凉茶指标性成分的 分离纯化方法，属于凉茶植物饮料质量控制技术 领域。该分离纯化方法以AB-8型大孔树脂进行粗 分，以HP20型大孔树脂进行细分，在液相色谱进 行检测监控的条件下，以Sephadex LH-20凝胶与 反相硅胶柱为固定相，对各组份进行色谱分离纯 化，最终得到能够作为王老吉凉茶指标性成分的 单体化合物，可用做对照品，辅助检测其中各成 分，为王老吉凉茶的质量检测提供先决条件和保 障。 A 6 5 7 8 7 4 7 0 1 N C CN 107478756 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种王老吉凉茶指标性成分的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤： 粗分：取王老吉凉茶浸膏，上样至AB-8型大孔吸附树脂柱；以3-5个柱体积的水洗脱，弃 去水液；再以2-4个柱体积的体积百分数为70-80％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；蒸干得 稠膏，备用； 细分：取上述稠膏，上样至HP20型大孔树脂柱；以3-5个柱体积的水洗脱，弃去水液；再 以8-12个柱体积的体积百分数为15-25％的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂得到组 份2；以8-12个柱体积的体积百分数为35-45％的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，将相同流份 合并，依次得到组份3和组份4；以15-25个柱体积的体积百分数为60-80％的甲醇水溶液洗 脱，收集洗脱液，回收溶剂，得到组份5； 纯化：将上述得到的各组份经Sephadex LH-20凝胶与反相硅胶柱分离纯化，并以液相 色谱进行检测监控，得到单体化合物，即为王老吉凉茶指标性成分。 2.根据权利要求1所述的王老吉凉茶指标性成分的分离纯化方法，其特征在于，所述粗 分步骤中：取王老吉凉茶浸膏，上样至AB-8型大孔吸附树脂柱；以4个柱体积的水洗脱，弃去 水液；再以3个柱体积的体积百分数为75％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；蒸干得稠膏，备 用； 所述细分步骤中：取上述稠膏，上样至HP20型大孔树脂柱；以3-5个柱体积的水洗脱，弃 去水液；再以10个柱体积的体积百分数为20％的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂得 到组份2；以10个柱体积的体积百分数为40％的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，将相同流份 合并，依次得到组份3和组份4；以20个柱体积的体积百分数为75％的甲醇水溶液洗脱，收集 洗脱液，回收溶剂，得到组份5。 3.根据权利要求1所述的王老吉凉茶指标性成分的分离纯化方法，其特征在于，所述纯 化步骤中： 将组份2上样至反相C18硅胶柱，先以甲醇-水梯度洗脱，再配合Sephadex LH-20凝胶柱 和反相C18硅胶柱，以甲醇-水梯度洗脱，并通过液