2.2.2_(示范课)动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

单克隆抗体 2012中国肿瘤登记年报:6人/分钟 抗体的传统生产方法 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差。 1、抗体的本质是什么？是由什么细胞产生的？主要分布在哪里？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 2、传统的抗体产生方法及缺陷是什么？ 从动物的血清中分离抗体 反复注射动物 抗原 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 3、问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 单克隆抗体的制备 （一） 1、如何获得B淋巴细胞？ 2、融合方式有几种？杂交瘤细胞有何特点？ 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 3、选择杂交瘤细胞的两次筛选的目的各是什么? 第一次筛选：用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞 第二次筛选（克隆化培养和抗体检测）：筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 大规模进行培养得到大量的单克隆抗体的途径？ （二）单克隆抗体的概念 单克隆抗体：单个细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 （三）单克隆抗体的优点： 特异性强、灵敏度高，且能大量制备 单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 单克隆抗体的应用信息 2010年全球治疗用单克隆抗体的销量达到440亿美元，如果加上100亿美元的单克隆抗体诊断和研究试剂，那么总的单克隆抗体市场将达到550亿美元。2011年单抗药物的市场总量已经达到628亿美元。 （四）单克隆抗体的应用 作为诊断试剂——最广泛应用（识别作用） 早孕检测试纸条 女性在怀孕以后体内会分泌绒毛膜促性腺激素。早期检测该激素, 对女性具有非常重要的指导意义。 黄曲霉毒素引起人的中毒主要是肝脏受侵，影响肝功能，引起肝细胞变性和坏死等，也能诱发胃癌、肾癌、直肠癌及乳腺、卵巢和小肠等部位的癌症。 从60年代到70年代，对黄曲霉毒素的限量要求一般是10～20pg／kg以下，而现在对黄曲霉素的限量要求达到2～4pg／kg以下甚至更低，对黄曲霉毒素含量的限量越低，则表明对检测仪器和方法的要求越高。 而在众多检测方法中，以单克隆抗体为基础的免疫技术免疫化学分析方法独占优势。 单克隆抗体技术 在黄曲霉毒素检测中的应用 优点： 准确、高效、简易、快速 用于治疗疾病和运载药物 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋抗癌药物 单抗导向，药物为弹头 主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。 优点： 位置准确、疗效高、副作用小 结合放射性同位素的单抗 -----生物导弹 全球治疗性单克隆抗体上市情况部分列表 商品名 适应症 巴利昔单抗 抗凝，心血管 Actemra 类风湿 Removab 胰腺癌 阿伦珠单抗 白血病，移植排斥等 帕尼突单抗 直肠癌 曲妥珠单抗 乳腺癌 BioMab 头颈肿瘤 Tumour Necrosis Therapy, Per 肺癌 我国单克隆抗体药物研发进展情况 近年来中国的单抗技术已经受到越来越多的关注和重视，单克隆抗体药物研究已被列入863计划和国家重点攻关项目。 单克隆抗体 应用 制备过程 优点 （1）技术：动物细胞融合、动物细胞培养 （2）原理：细胞膜的流动性、细胞增殖 概念