(精选)【抗生素课件课件】细菌的培养与生长教学课件.ppt

(2) 平板計數法 曲定量的菌(或孢子)懸浮液，採用塗佈平板(spread plate)或傾柱平板(pour plate)方法，於固體培養基上培養，一個菌落通常由一個細胞長成，但因不能確定卻由一個單一細胞長成所以測定結果常用菌落形成單位(colony forming unis,CFU)表示所以經由計算菌落可計算出樣品的活菌數。 (3) 薄膜過濾計數法 常用微孔薄膜過濾法(Millipore membrane filter technique)來測定空氣中或水中微生物的數目。將定量的樣品通過濾膜(membrane filter)後，菌體便被阻留在濾膜上，取下薄膜進行培養。計算其上之菌落數，從而可求出樣品所含之菌體數。 2.測定微生物的生長量或細胞量 不是測定細胞的數量，而是測定細胞的生長量或細胞量(cell mass)，以及與生長量相平行的生理指標。 (1) 秤重法 這是一種常見的方法，即直接秤量樣品的溼重或乾重。其法為將微生物培養液離心，收集細胞沉澱物，然後秤重即為溼重法。但若為將離心得到的細胞沉澱物，置於100-105℃的烘箱中乾燥並過夜，然後再秤重，即為乾重法。 (2) 混濁度測數法(Turbid metric method ) 較快速、敏感的方法是比較混濁度(turbidity)的方法，含菌的液體(培養液)由於細菌體細胞對光的消散作用而呈現混濁，細胞數目越多，對光的消散作用越強，混濁度就越高。混濁度可以用比色計(colorimeter)或分光光度計(spectrophotometer)測定培養液的混濁度。 (七)微生物的連續培養 連續培養(continuous culture)就是在一個恆定容積的流動系統中進行微生物的培養。一方面以一定的速率不斷地加入新的培養基；另一方面又以相同速率流出培養物(包括菌體和代謝物等)。如此可使培養系統中，細胞數量和營養物質的濃度保持恆定，即保持在穩定狀態。 連續培養系統(continuous culture system)主要有兩類型，化學恆常器或恆化器(chemostat)和混濁恆常器或恆濁器(turbidostat)。兩著之區別在於控制培養基流入到培養容器中的方式不同。 (1) 化學恆常器(Chemostat) 這種機器裝置是由一個可使液體溢出的虹吸管器皿，和一個可從儲備器中以一定速率流(滴)入新鮮培養液的設備所組成。培養的容器內以一道無菌的空氣來攪拌培養基，每滴進一滴新鮮培養液，就有一滴培養液被虹吸出去。細胞於移植到培養容器後，立即開始生長直到營養物質被用完為止，然後再讓新鮮的培養液流入，使其流速與細胞消耗完限制營養物質的速率相等。 (2) 混濁恆常器(turbidostat) 混濁恆常器(turbidostat)與化學恆常器相同之處在於也是維持培養液總體積不變，但不相同之處在於經由測定培養液的混濁度或細胞密度，以不斷調節培養液流入或排出的速率，以使培養液中微生物細胞密度保持一定(即一定的混濁度)。當混濁度超過某一限定標準，新鮮的培養液便流入。 化學恆常器是利用生物學方法控制生長，因其係經由限制性供給某一生長必需之營養物質，而使微生物以某一恆定之速率生長的；而混濁恆常器則是利用機械的方式，以維持微生物恆定的生長速率。 (八)環境因素對微生物的生長的影響 (一) 溶質雨水活度 水的可利用性常用水活度(water activity, )來表示，而純水的水活度( )為1，當水中有溶質時，水的活度就低於1，微生物的生活離不開水，微生物生長的最低水活度在0.60-0.99。於乾燥條件下，水活度低於0.60-0.70時多數微生物都不能生長。乾燥使細胞脫水，使微生物的代謝停止，而抑制微生物的生長，有時也可以引起微生物的死亡，像乾果、稻殼、奶粉等食品，通常採用乾燥方法保存，以防止腐敗。 第五章 細菌的培養與生長 一、培養基 人工所製備供給微生物生長、繁殖或累積代謝產物所用的營養基質稱為培養基(medium，或culture medium)。除此之外，用於微生物之分離和鑑定、抗生素敏感性之測定、水和食品的分析、工業微生物學及有關活動，專一性培養基也是很重要。雖然微生物種類、營養類型即培養目的多樣性，因而培養基的種類和配方很多，但是培養基的製備仍然有所依循。 自養型的微生物，因具有較強之生物合成能力，所以其培養基不能含有機物，應該完全由無機鹽類組成。反之，異養型微生物之生物合成能力較弱，所以其培養