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第五章 动物性食品中致病微生物和寄生虫的检验检疫;动物性食品中微生物污染的可能途径主要有:
食品原料本身的污染;
动物养殖环境中的微生物对食品原料的污染;
屠宰过程中的污染;
深加工动物食品可能受到加工车间、加工设备表面残存微生物污染;
食品从加工出厂、贮存、运输、销售过程中可以受到相应环境中微生物的污染;
在家庭、宾馆等厨房中生熟食品的交叉污染。;食品微生物检测所涉及的类群; 微生物检测程序; 菌落总数的检验程序;; 注意事项:;大肠菌群系指一群能发酵乳
糖、需氧和兼性厌氧的革兰
氏阴性无芽孢杆菌,包括肠
杆菌科的大肠埃希氏菌属、柠檬杆菌属、肠杆菌属和克雷伯菌属细菌。
检测大肠菌群,可以判定食品被与粪便污染有关的细菌污染的程度。如果某食品的大肠菌群超标,则可以推测其产品中存在着肠道致病菌污染的可能性,食用之可能导致食物中毒或罹患流行病。
;第二节 动物性食品中致病性细菌的检验
沙门氏菌
致病性大肠杆菌
副溶血弧菌
金黄色葡萄球菌
溶血性链球菌
产单核细胞李斯特菌
肉毒梭菌
结核分枝杆菌
空肠弯曲杆菌
炭疽杆菌
产气荚膜梭菌
蜡样芽孢杆菌
变形杆菌;食品中沙门氏菌检验;一、实验目的
1、掌握食品中沙门氏菌的检验原理。
2、掌握食品中沙门氏菌的检验方法。; 二、实验原理(一)沙门氏菌属简介;沙门氏菌属——生物学特性;培养特性:
沙门氏菌需氧或兼性厌氧,10~42℃都可生长,最适生长温度为37℃,最适pH为6.8~7.8。
营养琼脂平板上:35~37℃培养18-24h,其菌落大小一般为2~3mm,光滑、湿润、无色、半透明、边缘整齐。
血平板上:中等大小的灰白色菌落。;沙门氏菌属的抗原; 沙门氏菌属——致病性; (二)检验; 三、实验仪器和材料
1 冰箱:0℃~4℃。
2 恒温培养箱:36℃±1℃,42℃。
3 显微镜:10×~100×。
4 高压灭菌器。
5 超净工作台。
6 均质器或灭菌乳钵。
7 架盘药物天平:0g~500g,精确度0.5g。
8 灭菌广口瓶:500mL。
9 灭菌锥形瓶:500mL、250mL。
10 灭菌吸管:10mL(具0.1 mL刻度)。
11 天菌培养皿:90mm。
12 灭菌小试管:内径3mm×50mm。
13 灭菌毛细管。; 四、培养基和试剂
1 缓冲蛋白胨水(BP)
2 氯化镁孔雀绿(MM)增菌液
3 四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液
4 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液
5 亚硫酸铋琼脂(BS)
6 DHL琼脂
7 HE琼脂:按GB/T 4789.28—2003中4.21规定。
8 TSI琼脂
9 蛋白胨水、靛基质试剂
10 尿素琼脂(pH7.2)
11 氨基酸脱羧酶试验培养基
12 沙门氏菌因子血清:按26种用于初步分型;57种用于进一步分型;163种用于详细分型。;;六、沙门氏菌检验流程; 七、操作步骤; 鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。各取25g(25mL)加入灭菌生理盐水25mL,按前法做成检样匀液;取25mL,接种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫磺酸钠煌绿增菌液内,于42℃培养24h;另取25mL接种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液内,于36℃±1℃培养18h~24h。;;沙门氏菌属各群在各种选择性琼脂平板上的菌落特征 ;; 肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果 ;肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表 ;沙门氏菌检验——几点注意;金黄色葡萄球菌细菌学及其检验 ;1 生物学性状 ;;;在普通琼脂培养基上形成圆形、凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的菌落。直径一般为1-2mm,密集生长的菌落较小,稀散或生长较久着, 直径可达4-5mm。
在普通肉汤培养基中生长迅速,一般呈均匀混浊生长,如培养基中的糖类被分解后,产生较多的酸性物质即可发生酸性沉淀。培养时间较长,2-3日后常有菌膜形成而出现粘性沉淀。
;;;;2 致病性;2 致病性;;;结核分枝杆菌;分枝杆菌属Mycobacterium
一类直或微弯曲的杆菌,有分枝生长趋势,可呈丝
状或菌丝样生长。细胞壁脂质含量高(分枝菌酸),
耐酸,抗酸染色阳性。对氧和营养要求高,生长慢。
不产生毒素和侵袭酶类,引起慢性疾病。
又称抗酸杆菌(acid-fast bacillus)---不易着色,可抵抗盐酸酒精的脱色作用
分类属放线菌科,本属有80多种,可分三类:
结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。
细菌的DNA G+Cmol%为62-70
; 临床标本
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