(精选)RNA的生物合成(转录)教学课件.ppt

1. 进位 根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核糖体A位。 2.转肽 50S大亚基有转肽酶活性，催化P位上fMet-tRNAffMet（或延长中的肽酰-tRNA），将氨基酰基（或延长中的肽酰基）从tRNA转移，与A位新进的氨酰-tRNA的?-氨基形成肽键。成肽后，P位留有卸载的tRNA， A位是多了一个氨基酸残基的肽酰-tRNA。 肽链合成延长阶段的肽键形成过程 转 肽 Mg2+，K+ 转肽酶 O O AUG UAC 给 受 C O = R-CH NH C O= H3CSCH2CH2-CH NH2 O OH AUG UAC 给 受 CH2CH2-CH C = O CH-R NH2 O= C NH2 CH3 S 3.移位 延长因子EF-G有转位酶活性，可结合并水解1分子GTP，促进核糖体向mRNA的3`侧移动。使肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核糖体P位，而卸载的tRNA则移入E位，A位留空对应下一组密码子，适当的氨基酰-tRNA准备进位，开始下一轮核蛋白体循环。 移 位 进位 移位 转肽 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 真核生物延长过程 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码子进入核糖体A位点，终止因子（RF）识别终止密码，多肽链合成停止，转肽酶活性变成水解酶活性，肽链从肽酰-tRNA中释出，（通过水解GTP，）核糖体与 mRNA等解离，蛋白质合成终止。 终止因子又称释放因子 一、识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 二、诱导转肽酶改变为酯酶活性，相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上，使肽链从核糖体上释放。 终止因子的功能 原核生物终止因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物终止因子：eRF 原核肽链合成终止过程 动画 蛋白质合成过程 蛋白质合成的能量消耗 每形成一个肽键消耗四个高能键： 1、氨基酸的“活化”消耗二个高能键； 2、氨酰-tRNA的“进位”消耗一个高能键； 3、肽酰-tRNA的“移位”消耗一个高能键。 起始1分子GTP 终止1分子GTP 四、核糖体的跳跃式读码 翻译位移 核糖体在读码时表现为一个碱基位移。 翻译跳跃 核糖体在读码时表现为跳跃一大段mRNA再继续翻译。 跳跃式阅读可能与蛋白质内含子有关。 蛋白质内含子 90年代初，发现了两类新的内含子。 一类是蛋白质内含子，其内含子DNA序列与外显子一起转录和翻译，产生一条多肽链，然后从肽链中切除与内含子对应的氨基酸序列，再把与外显子对应的氨基酸序列连接起来，成为有功能的蛋白质。 另一类是翻译内含子，mRNA中存在与内含子对应的核苷酸序列，在翻译过程中这一序列被“跳跃”过去，因此产生的多肽链不含有内含子对应的氨基酸序列。 核糖体的存在形式： 核糖体的存在形态有三种：核糖体亚基、单核糖体和多核糖体。 核糖体亚基可在10mmol/L浓度的 Mg2+溶液中聚合，在0.1mmol/L 浓度的Mg2+溶液中解聚。 真核生物：游离核糖体或与内质网结合 原核生物：游离核糖体或与mRNA结合成串状的多核糖体(提高翻译效率)。 在蛋白质生物合成过程中，常常由若干核糖体结合在同一mRNA分子上，同时进行翻译，但每两个相邻核蛋白之间存在一定的间隔，形成念球状结构。 由若干核糖体结合在一条mRNA上同时进行多肽链的翻译所形成的念球状结构称为多核糖体。 多聚核蛋白体（polysome） 原核生物翻译过程中核糖体结构模式 P位：肽酰位 （给位） A位：氨酰位 （受位） E位：排出位 （出位） 核蛋白体的大、小亚基分别有不同的功能： 1．小亚基：可与mRNA、GTP和起动tRNA结合。 2．大亚基： （1）具有两个不同的tRNA结合点。A位（右）可与新进入的氨基酰tRNA结合；P位（左）可与延伸中的肽酰基tRNA结合。 （2）具有转肽酶活性：将给位上的肽酰基转移给受位上的氨基酰tRNA，形成肽键。 （3）具有GTPase活性，水解GTP，获得能量。 （4）具有起动因子、延长因子及释放因子的结合部位。 三、氨基酸的运载 ---tRNA与氨基酸活化 tRNA是将mRNA的核苷酸顺序转换成蛋白质多肽链顺序的适配器： 在蛋白质合成中， tRNA起着运载氨基酸的作用，tRNA的3′末端结合特定的氨基酸。 tRNA分子上三个特定的碱基组成一个反密码子，位于反密码子环上