(精选)实验动物微生物学分类与控制教学课件.pptVIP

四、无菌动物 定义 无菌动物（ Germ-Free Animal,GF）是指用现有的监测技术在动物体内外的任何部位，均检测不出任何活的微生物和寄生虫的动物。饲养于隔离环境，属四级动物。 应用：举例说明 无菌动物的发展过程 1895—1910年 解决了无菌生命能否生存的问题 Pasteur认为动物没有肠道菌参与不能生存。生物学家NenK提出了相反的看法，由此开展了一场学术上的争论。十年后，1895年Nuttall 和Thierfelder经剖腹产，用牛奶饲喂获得了无菌豚鼠，第八天后处死，肠道内未检出细菌。1898年Scottellies获得了无菌鸡，无菌环境中养活了17天，至此建立了无菌生命可以存活的论点。 无菌动物的特点 （一）形态学改变 消化系统：无菌动物盲肠及其内容物重量可达体重25%，多数情况下，无菌动物盲肠是普通动物的5—10倍。无菌动物由于盲肠膨大，肠壁菲薄，常易发生肠扭转导致肠壁破裂而死亡。有关盲肠膨大原因尚无定论。 血液循环系统：心脏相对变小，白细胞数少，且数量波动范围小，与无病原体入侵有关。 免疫系统：由于无菌动物几乎没有受过抗原刺激，其免疫机能基本上处于原始状态。胸腺中网状上皮细胞较大，其胞浆内泡状结构和溶酶体较少，胸腺和淋巴结处于不活跃状态，脾脏变小。 （二）生理学改变 免疫功能：由于网状内皮系统、淋巴组织发育不良，淋巴小结内缺乏生发中心，产生γ-球蛋白的能力很弱。血清中IgM、IgG水平低，免疫功能处于原始状态，应答速度慢，过敏反应、对异体移植的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱。用低分子无抗原饲料饲喂无菌动物时，血清中几乎不存在γ-球蛋白和特异性抗体。 生长率：无菌禽类普通禽类 ；无菌大小鼠≈普通大小鼠 无菌豚鼠、家兔普通豚鼠、家兔 繁殖率：规律同生长率 代谢：血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长。 营养：无菌动物体内不能合成VB和VK，易发生缺乏症。 抗辐射能力：无菌动物能力强于普通动物，无菌小鼠抗实验性烫伤引起的休克死亡能力也强于普通小鼠。 寿命：无菌动物普通动物 无菌动物的应用 在微生物学研究中的应用 在免疫学研究中的应用 在放射医学研究中的应用 在营养、代谢研究中的应用 在老年病学研究中的应用 在心血管疾病研究中的应用 在毒理学研究中的应用 在肿瘤学研究中的应用 在宇航医学研究中的应用 在寄生虫学研究中的应用 在口腔医学研究中的应用 抗体制备研究 普通动物体内细菌种类多，很难制备较纯的抗体;无菌动物缺乏抗原刺激，免疫系统处于“休眠”状态,对外来刺激，有迅速、单一和持久作出反应的特性，如果接种单一的菌株，会产生较纯的、高效价的、且不会污染其他微生物的抗体。 五、悉生动物(gnotobiotic animal,GN) 悉生动物也称已知菌动物或已知菌丛动物，是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。属四级动物，饲养于隔离系统。分为单菌、双菌和多菌动物。 悉生动物的特性 悉生动物肠道内存在能合成某种维生素和氨基酸的细菌，不象GF动物发生维生素缺乏症，生活力较强，抵抗力明显增加，易于饲养管理。 中国药检所利用五联菌悉生动物（大肠埃希氏杆菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、粪链球菌和乳酸杆菌）可替代无菌动物进行药物检定。 悉生动物在生物医学研究中的应用 微生物学研究 在无菌动物断奶前后，接种一种或多种菌，可观察这些细菌对机体的作用。 了解细菌之间及细菌与机体之间相互关系和菌群失调现象。 观察机体、微生物、致病因子三方面相互作用的关系。 第三节 洁净动物与普通动物的 特性比较 洁净动物是指来源于剖腹产，实行严格的微生物控制，饲养于空气净化设施内的动物，主要包括：清洁动物、SPF动物、悉生动物和无菌动物。 一、各等级动物的相关关系 二、微生物控制比较 由于动物分类等级不同，因而其微生物控制程度也不一致，与之相对应的动物饲养环境及饲养管理方法也各不相同。 按微生物控制程度的实验动物分类原则 三、对科研实验结果影响的比较 四等级动物优缺点比较 四、如何选择不同等级的实验动物？ GF、 GN动物在绝对屏障内维持，管理复杂，无菌状态的保持难、产量低、价格高，实际应用有限。 GN动物多用于研究微生物与微生物、微生物与宿主间相互关系的动物模型。SPF动物在相对屏障中维持，易管理、产量大、价格低。因其不携带病原体，不影响实验结果，在发达国家己广泛应用，是目前国际标准级别的实验动物。 五.等级动物优缺点比较 CL动物近年来在我国得到了广泛的应用。它较普通动物健康，又较SPF易达到质量标准，在动物实验研究中可免受动物疾病的干扰，其敏感性及重复性亦较好，是国内科研工作主要要求的标准级别的动物