(精编)【医学课件】 电离辐射的细胞效应教学课件.ppt

第四章电离辐射的细胞效应;第一节细胞的放射敏感性;衡量辐射敏感性的指标 个体，常用存活率或半致死剂量 细胞，多数情况下都用克隆形成率(成灶率)表示其存活率，对肿瘤细胞也用SF2(2Gy照射后的存活率)；此外，染色体畸变率也是常用的评价指标。;一、哺乳动物细胞辐射敏感性的差异;二、不同细胞周期时相的放射敏感性;; G1 →细胞间期 S →DNA合成期 G2→细胞间期 M→细胞分裂期 对辐射的敏感性： M G2 G1 S早S晚;;慢性低剂量照射 细胞更新系统的再生反应取决于体内许多因素 细胞本身的因素有： 1）细胞新生速率 2）细胞丢失速率 3）细胞周期时间;三、环境因素对细胞放射敏感性的影响;四、细胞放射敏感性的机制探讨;凡是有双链重接缺陷的细胞，其敏感性都是高的；然而敏感性高的细胞却不一定有明显的重接修复异常。原因有：（1）修复效率变化的幅度较小，现有的测定方法不够灵敏，不能测知。（2）重接速率虽无变化，但修复不正确。如AT。（3）各时相细胞内天然存在的SH化合物水平不同，G2/MS。（4）存在别的机理。;第二节 电离辐射对细胞周期过程的影响;一、细胞周期的运行原理;周期蛋白c主要在果蝇及人的细胞中发现； 周期蛋白D则主要存在于鼠类及人的细胞，它在休止细胞中不表达，经生长因子刺激后表达增加；周期蛋白D的表达水平在细胞周期任何时点都不锐减，其合成和活性在GI后期亦仅达一较低峰值；周期蛋白D活性依赖细胞内生长因子的存在，除去生长因子则周期蛋白D水平即刻降低，周期蛋白D与cDK4／CDK6形成复合物，调节G1期进展；;周期蛋白E是人类的GI周期蛋白，其mRNA和蛋白质水平在G1／s交界处急剧升高达峰值，进入s期后降解，周期蛋白E—CDK2复合物调节细胞周期进入S期，并在人类细胞的DNA合成启动中起重要作用。 ;;2、M期周期蛋白和CDKs M-周期蛋白是指在G2／M期转换时发挥作用、诱导细胞分裂的一类周期蛋白。包括周期蛋白A和周期蛋白B。 周期蛋白A主要在S期发挥作用，它合成始于G1后期、进入S期后形成周期蛋白A—CDK2复合物，调节S期进展。;周期蛋白B表达水平至G2期达峰值，周期蛋白B－CDC(cell division cycle gene)复合物调节细胞周期进人M期 周期蛋白A在S期发挥作用，与DNA复制的完成有关；周期蛋白B在G2／M交界处发挥作用，诱发细胞分裂.;2 、周期蛋白依赖性激酶活性的调控 1）CDK的激活 CDK的活性依赖于与周期蛋白的结合和保守苏氨酸残基的磷酸化，CDK活性受周期蛋白结合以及特定保守苏氨酸残基磷酸化的调节。 2）CDK抑制 CDK—周期蛋白复合体中周期蛋白的解离和磷酸化激活位点Thr的去磷酸使CDK处于失活状态．因而，在细胞周期中使周期蛋白水平下降与激活位点Thr去磷酸的有关因素也是CDK抑制调控的重要因素。;二、几个参与细胞周期调控的重要基因;1、pRB（nuclear phosphoprotein） pRB作为细胞周期和基因转录调控的枢纽，通过调整E2F等转录因子的功能在细胞增殖和分化的控制中发挥关键作用。 在某一给定细胞中pRB水平相对恒定，而其磷酸化/去磷酸化状态则随着细胞周期的进展而变化：在G1早期，pRB主要以脱磷酸化的活性形式存在， pRB的磷酸化主要发生在G1中期，到S期和G2／M期则主要以高度磷酸化形式存在。 ; G1期pRB磷酸化主要由周期蛋白D－CDK4／CDK6复合物催化完成。 pRB的去磷酸化在M及s期由蛋白磷酸酶1催化进行。在周期蛋白－CDK复合物与蛋白磷酸酶1的协同作用下，pRB的磷酸化／去磷酸化之间的动态平衡有效控制着G1限制点的“开启和关闭”，从而保证细胞周期的有序运行及细胞的正常增殖。;G1/S调控点以pRb为中心构成一个复杂网络,其共同的模式是 : 生长因子与相应受体结合,通过信号传递促进cyclin基因表达；cyclin与相应的CDK结合为激酶复合物对pRb进行磷酸化；磷酸化的pRb释放其结合并抑制的蛋白,主要是转录因子E2F以及具激酶活性的CAB-1蛋白等；游离的E2F进入核内,与多种具特殊序列的基因启动子区结合(如c-myc、b-myb、cdc2、二氢叶酸还原酶、TK及E2F-1基因等),促进这些基因的表达；这些基因的产物促进细胞通过G1/S调控点.CKI通过抑制cyclin-CDK激酶活性,使pRb不能磷酸化,pRb仍与E2F结合,E2F则不能进入核内发挥转录作用,使细胞停滞于G1期.;;2、p21WAF1/CIP1 p21基因定位于第六号染色体短臂上(6p21.2），P21蛋白定位于细胞核中，属CKI分子（CDK抑制分子），能广