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· 80·
·论 著·
BV
针对H X基因的siRNA抑制HepG2细胞
HBV的复制和表达
张晓锋张建军 史小玲王明勇 白伟利
【摘要】
DNA
的变化。结果 成功构建了针对HBV
DNA的复制亦受到抑制,抑制率31%。结论针对HBVx基因转录体的siRNA在体外具有抑制HBV复制和抗原表
达的作用。
【关键词】RNA干扰乙型肝炎病毒基因重组
eff&tofsiI州A BViral B、,iral
IIllIibitory targetingh叩atitis X鲫e蚰hepatitismpIicati蚰and
invitmZHANG 10075
Xino知”g,ZHANG,如可“挖,SHJXi盘ozi”g,甜nz.G缸oz抽HDspi衄z;X缸卵7
ToestablishanRNAi thatcan theX of
【Abstract】objectiv鹧 approach specificallytarget genesequencehepatitis
B shortinterferiflgRNA(siRNA)invivo,andtoassessthe effectofthissiR—
virus(HBV)bysynthesizing irl}libitory
NAonHBV andits MethodsArecombinant whichcantranscribethe
replicationantigenexpression plasmidpSIH王Ⅳ/X
siRNA HBVX wasconstructed theannealed intolinearized
targeting gene bycloning synthesizedsequences pTZU6+1
vectorandnamedas contains1.3一fold—overJ
pSIHBV/x.Secondly,theeukaryoticexpressionplasmidpHBVl.3。which
ofHBV,werecotransfectedinto cells GenePORTER2tmnsfectionwitheitherthe
lengthgenome HepG2using reagent
RNAi orunrelatedcontrOl and72hoursaftertransfection,thelevelsof
plasmidpSIHBV/X plasmidpSIGFP.At24,48
and intheceUculture weredeteminedwithELISAkits.TheHBVDNAinthe
HBsAgHBeAg supematant supermtant
wasalsodetemined AsiRNA
byfluorogenicquantitativePCR(FQ-PCR).R鹤llltstrans
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