针对HBV X基因的siRNA抑制HepG2细胞HBV的复制和表达.pdfVIP

针对HBV X基因的siRNA抑制HepG2细胞HBV的复制和表达.pdf

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· 80· ·论 著· BV 针对H X基因的siRNA抑制HepG2细胞 HBV的复制和表达 张晓锋张建军 史小玲王明勇 白伟利 【摘要】 DNA 的变化。结果 成功构建了针对HBV DNA的复制亦受到抑制,抑制率31%。结论针对HBVx基因转录体的siRNA在体外具有抑制HBV复制和抗原表 达的作用。 【关键词】RNA干扰乙型肝炎病毒基因重组 eff&tofsiI州A BViral B、,iral IIllIibitory targetingh叩atitis X鲫e蚰hepatitismpIicati蚰and invitmZHANG 10075 Xino知”g,ZHANG,如可“挖,SHJXi盘ozi”g,甜nz.G缸oz抽HDspi衄z;X缸卵7 ToestablishanRNAi thatcan theX of 【Abstract】objectiv鹧 approach specificallytarget genesequencehepatitis B shortinterferiflgRNA(siRNA)invivo,andtoassessthe effectofthissiR— virus(HBV)bysynthesizing irl}libitory NAonHBV andits MethodsArecombinant whichcantranscribethe replicationantigenexpression plasmidpSIH王Ⅳ/X siRNA HBVX wasconstructed theannealed intolinearized targeting gene bycloning synthesizedsequences pTZU6+1 vectorandnamedas contains1.3一fold—overJ pSIHBV/x.Secondly,theeukaryoticexpressionplasmidpHBVl.3。which ofHBV,werecotransfectedinto cells GenePORTER2tmnsfectionwitheitherthe lengthgenome HepG2using reagent RNAi orunrelatedcontrOl and72hoursaftertransfection,thelevelsof plasmidpSIHBV/X plasmidpSIGFP.At24,48 and intheceUculture weredeteminedwithELISAkits.TheHBVDNAinthe HBsAgHBeAg supematant supermtant wasalsodetemined AsiRNA byfluorogenicquantitativePCR(FQ-PCR).R鹤llltstrans

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