食品中微生物的快速检测.pptVIP

微生物快速检测方法 1.ATP生物荧光法 2.电阻抗法 3.颜色变化 4.流式细胞技术及激光扫描技术 5.热量法、放射测量法 ATP生物荧光法 一.原理 “ATP荧光法微生物快速检测系统”简称“细菌快检仪”，依据萤火虫发光原理研制，由试剂组、微量荧光检测仪、样品预处理耗材三部件组成。该仪器可在短短1-5分钟内即完成测试，并提供实时检测数据，具备准确、便携、操作容易等特点，同时可以连接电脑，对数据进行储存。 ATP＋萤光素+萤光素酶+O2—AMP+Ppi+二氧化碳+氧化萤光素+光 ATP生物荧光法 二.应用 可用于：食品、医药卫生、医药、日化、造纸、工业水处理、国防以及环保、水政、海关出入境检疫及其他执法部门等多种行业。 电阻抗法 原理 　供细菌生长的液体培养基是电的良导体，在特制的测量管底部装入电极插头，即可对接种生长的培养基的阻抗变化进行检测。阻抗变化的产生是由于微生物生长过程中的新陈代谢使培养基中的大分子营养物质(糖、脂类、蛋白质等）被分解成小分子代谢物，即较小的带电离子（乳酸盐、醋酸盐、重碳酸或氨等）这些代谢产物的出现和聚集，增强了培养基的导电性能，从而降低了其阻抗值。 通过颜色变化检测 微生物生长导致培养基pH值发生变化，由光学检测器检测底部琼脂层 　的颜色变化，记录达到突变点的时间。 与阻抗法类似，可以实现快速检测。 缺点：需要购买原厂的预装培养基，应用范围受限制，成本高昂。 流式细胞技术 原理 　液体样品流过仪器中的激光照射的流动池，当微生物流过显微镜聚焦的流动池时就能被自动地检测到。 特点 　检测方法与使用的仪器有高度的特异性，所以应遵循生产厂商提供的方法。 　 流式细胞技术 FOSS公司BactoScan FC牛奶中总菌数快速检测仪 采用流式细胞原理。对微生物进行核酸染色，用流式细胞技术进行计数。 优点：速度快(50-150样品/小时) 缺点：死活细胞一起检测，消耗成本较高，仪器比较难保养。灵敏度不够高。 适合牛奶企业检测原奶中细菌总数。 流式细胞技术 美国Chemunex公司微生物快速检测系统 将流式细胞技术与活细胞荧光探针标记及激光扫描技术相结合，推出的最新一代的速度更快的Bactiflow以及更高端的ScanRDI和D-count微生物快速检测仪。 其最大的特点是只检测活细胞数，速度极快，处理量大。 检测步骤：1、过滤；2、标记，直接对活细胞和酵母进行标记；3、激光扫描。 　利用细菌生长时产生热量的原理设计而成。微生物在生长和代谢的过程中，能产生大量的代谢热。由于各种微生物的代谢产物热效应不同，因此可显示出特异性的热效应曲线图。热效应曲线图的形成，是由于培养基含有多种成分，微生物则产生多种不同的代谢产物，以此表现出的热效应为多个曲线峰，如为单一营养成分，则只有一个峰出现。 　在细菌生长的过程中，用微量量热计测量产热量等热数据，经计算机处理，绘制成以产热量对比时间组成的热曲线图，以此推断细菌存在数量。 发射测量法 　利用细菌在代谢碳水化合物时产生CO2的原理，把微量的放射性标记引入葡萄糖或其他糖类分子中。细菌生长时，糖被利用并放出标记的CO2，将生成的放射性标记CO2从培养装置中导出或用化学法吸收后，利用专用的放射测量仪来测定放射性CO2 。放射量与菌数成正比。 RVLM微生物快速检测仪 德国RBG公司RVLM微生物快速检测系统是为客户在微生物检测方面的需要和需求提供创新的解决方案.整套RVLM微生物快速检测系统包含了检测仪器及电脑软件和专配的检测瓶.该产品得到美国EPA、美国军方、加拿大政府和贝尔实验室等权威机构的认可和广泛应用。 检测步骤 放入样本 打开瓶盖，加入11ml无菌水 放入液态（固态）样本0.1~1.0ml（0.1~1.0g） 盖紧瓶盖 摇动瓶子直到溶剂充分溶解 充分溶解混合后立即放入检测仪 ，得到100%定量分析结果 使用后无菌处理 ：按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方 放心安全丢弃（与过期药物同样处理） 检测范围 活细菌总数 大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌0157、0111、 0104等 肠道杆菌科 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌、绿脓杆菌 沙门氏菌 李斯特菌 肠球菌 曲霉属真菌、曲霉菌属 酵母菌 主要特点 可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本 仪器检测原理：集合培养皿法、酶法（β-葡萄糖苷酸酶分析）、免疫法（抗原搜寻）及基因法 8个检测位都是独立作业可满足检测不同样品不同微生物的需求.每个检测位都是独立的. 为检测更多的样品可多台机连接至同一台计算机使用， 可以自动选择控制检验项目温度； 三光波同时检测（蓝，绿，红） 检测结束后自动产生定量分析报告 操作中如果翻盖则自动停止分析，具